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紫外分光光度计法测DNA纯度纯度偏小的原因?
如题所述
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推荐答案 2011-06-12
1.DNA发生了损失,比如降解(虽然很少)
2.溶解DNA的溶液影响,水溶液的吸光低于tris中的吸光
追问
其它的原因呢?比如其它杂质没除完全之类的。
追答
杂质应该是导致测定纯度偏高(虚高),比如RNA混入了
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其他回答
第1个回答 2011-06-12
杂质如单双链RNA,单链DNA,核苷酸会偏大
蛋白质会偏小
第2个回答 2011-06-13
仔细清洗分光光度计比色皿,增大透光
相似回答
DNA
或RNA样品不纯,用
紫外分光光度计
测定其浓度和
纯度的
准确性会受到影响...
答:
分光光度计
采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光源透过
测试的
样品后,部分光源被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。核酸的定量
DNA
和RNA都有吸收
紫外光的
性质,它们的吸收高峰在260nm波长处,每种核酸的分子构成不...
利用
紫外分光光度计测
得
DNA
或RNA浓度的结果比实际浓度一般 是偏高还 ...
答:
现在利用
紫外分光光度
仪测出来的DNA和RNA的浓度应该是比较准的了,利用琼脂糖凝胶电泳检测后也可以对dna和RNA的浓度进行定量分析,但是比较费时间,有条件的实验室都开始用紫外分光光度仪
测DNA
和RNA的浓度了。望采纳
紫外分光光度计
检测
DNA
最高值不在260,为什么?
答:
用
紫外分光光度法
对
DNA
进行纯度鉴定,由于核酸中碱基具有共轭双键,因此核酸具有紫外吸收的性质,其最高吸收峰在260nm处。
如何使用简单的实验方法检测
DNA纯度
答:
2. 用可扫描的
紫外分光光度计
测定制备的DNA/RNA的紫外吸收曲线,测定OD260和OD280,并计算比值:OD260/OD280,纯
DNA的
此比值约为1.8~2.0。纯RNA的此比值约为大于2.0。3. 根据:每毫升1微克的纯DNA的OD260值= 0.020,计算所得DNA的纯度;每毫升1微克的纯RNA的OD260值= 0.025,计算所得...
超微量
分光光度计测dna
浓度时浓度变化
的原因
答:
光学路径的误差,测量环境影响。超微量
分光光度计测DNA
浓度时,浓度变化受到样品制备溶液混合不均匀性、光学路径误差、测量环境影响因素影响。
紫外
测定
dna
含量存在的问题,怎么解决
答:
首先,
分光光度计测量的
样品必须是均一的,摇匀后再测量结果会准确些。它是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链
DNA
,以及RNA。
dna纯度
浓度测定时, 为什么测230nm处的od
答:
除了核酸浓度,
分光光度计
同时显示几个非常重要的比值表示样品的纯度,如 A 260 / A 280的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是 280 nm。纯净的样品,比值大于 1.8(
DNA
)或者2.0(RNA)。如果比值低于 1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。A 230表示样品中存在一些污染物...
电泳法和
紫外分光光度法
检测
DNA的
浓度和
纯度
,哪种方法更好
答:
但是,由于电泳中染色特异性很强,对
DNA
、RNA之外的小分子污染情况无法检测。
紫外法
可对样品中所有具紫外吸收特性的物质给出一个综合的结果。因此如果样品中有其他影响DNA后续操作的物质,样品吸光值就会有很大偏移。值得注意的是,紫外法仅可作为一个参考,吸光值是结果,而不是原因。吸光值符合要求并...
简述如何通过
分光光度法
判断
DNA的纯度
。
答:
【答案】:
分光光度法
不但能确定核酸浓度,还可通过测定在260nm和280nm的
紫外光
吸收值的比值(A260/A280)估计核酸的纯度。纯净的
DNA
制品的A260/A280为1.8。DNA样品A260/A280为1.8~2.0时,表明样品纯度已达到要求。DNA样品A260/A280比值低于1.6时,表明有蛋白质或苯酚污染,应用苯酚-氯仿抽提,...
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