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怎样确定dna的纯度
简述
如何
通过
分光光度法判断DNA的纯度
。
答:
【答案】:分光光度法不但能确定核酸浓度
,还可通过测定在260nm和280nm的紫外光吸收值的比值(A260/A280)估计核酸的纯度。
纯净的DNA制品的A260/A280为1.8
。DNA样品A260/A280为1.8~2.0时,表明样品纯度已达到要求。DNA样品A260/A280比值低于1.6时,表明有蛋白质或苯酚污染,应用苯酚-氯仿抽提,...
dna纯度的判断
根据什么?
答:
【DNA纯度判断根据】:DNA纯度的判断根据OD260/OD280的比值判断
,符合要求纯度高的纯化DNA其OD260/OD280在1.6-1.8之间,低于此范围表明蛋白质含量超标,高于此范围表明样品中含有RNA。【光密度概念】:OD是optical density(光密度)的缩写, OD=1og(1/trans),其中trans为检测物的透光值。吸光度...
实验室体现
DNA
质量和完整性的可以依赖哪些指标
判断
?
答:
1、相对分子量:通过比较DNA的相对分子量(也称为分子大小)来评估DNA的纯度和完整性
。高品质的DNA通常具有高分子量,而低品质或部分降解的DNA则可能表现为相对分子量低。2、
A260/A280比值
:通过测量DNA的A260和A280吸光度,计算其A260/A280比值来评估DNA的纯度。理想情况下,DNA的A260/A280比值应该...
如何判断
提取质粒
DNA的纯度
答:
可以通过紫外吸收检测
。因为核酸的最大吸收波长为260nm,蛋白质为280nm,在波长260nm时,1OD值相当于双链DNA浓度为50μg/ml,单链寡核苷酸的含量为30μg/ml,可以据此来计算核酸样品的浓度,还可通过测定在260nm和280nm得OD值的比值,估计核酸的纯度。
纯净DNA的比值为1.8, RNA为2.0
。若比值高于1....
如何
使用简单的实验方法检测
DNA纯度
答:
DNA(ug/ml)=50×OD260读数×稀释倍数
。RNA(ug/ml)=40×OD260读数×稀释倍数。DNA/RNA纯品的OD260/OD280为1.8或2.0,故根据OD260/OD280的值可以估计DNA的纯度。若比值较高说明含有RNA,比值较低说明有残余蛋白质存在。OD230/OD260的比值应在0.4-0.5之间,若比值较高说明有残余的盐存在...
检测核酸
纯度
方法
答:
(OD260/OD280),估计核酸的纯度。
纯净DNA的比值为1.8, RNA为2.0
。若比值高于1.8说明DNA样品中的RNA尚未除 尽,若样品中含有酚和蛋白质将导致比值降低。270nm存在高吸收表明有酚的干扰。 紫外
分光光度法
只能用于测定浓度 大于0.25μg/ml的核酸溶液,对浓度更小的样品,可采用荧光分光光度法。...
如何
使用简单的实验方法检测
DNA纯度
?
答:
选用光程为0.5cm的石英比色杯,在紫外分光光度计上测定OD260和OD280的值,按以下公式计算
DNA
浓度.DNA浓度(ng /µL)=OD260×50×稀释倍数 当OD260/OD280< 1.8,表示蛋白质含量较高 当OD260/OD280> 2.0,表示RNA含量较高 当OD260/OD280=1.2.0,表示DNA较纯 ...
DNA
浓度鉴定
纯度
鉴定方法有哪些
答:
选用光程为0.5cm的石英比色杯,在紫外分光光度计上测定OD260和OD280的值,按以下公式计算
DNA
浓度.DNA浓度(ng /µL)=OD260×50×稀释倍数 当OD260/OD280< 1.8,表示蛋白质含量较高 当OD260/OD280> 2.0,表示RNA含量较高 当OD260/OD280=1.2.0,表示DNA较纯 ...
通常用来鉴定核酸样品
纯度
的指标是( )。
答:
【答案】:A A项,实验中常利用260nm与280nm的吸光度比值(A260/A280)还可以
判断
从生物样品中提取的核酸样品
的纯度
。DNA纯品的A260/A280的比值应为1.8;而RNA纯品的A260/A280的比值应为2.0。BD两项,
DNA的
Tm值与DNA长短以及碱基的GC含量相关。GC的含量越高,Tm值越高;离子强度越高,Tm值...
如何
利用分光光度计测量
dna
样品的浓度和
纯度
?还有其他方法?他们之间...
答:
取1μ
DNA
,用ddH2O水稀释到1ml,以1ml ddH2O为对照,紫外分光光度计测定OD260,OD280,OD260/OD280(都在 1.8左右之间,说明 DNA样品
纯度
较高),concentration。另,基因组DNA1%的琼脂糖凝胶电泳检测均呈现完整清晰条带没有拖尾,说明 DNA 样品的完整性好,也可通过DNA marker 推算出DNA浓度。
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