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琼脂糖凝胶电泳条带怎么看
凝胶电泳
中
条带
的位置和其宽度和颜色深浅有什么关系吗?
答:
凝胶电泳
中
条带
的位置与电泳速度有关,宽度与样品的不均一性有关和颜色深浅与含量高低有关。带电颗粒在电场作用下,向着与其电性相反的电极移动,称为电泳。利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。常用凝胶电泳分类:(1)
琼脂糖
( Agarose ) 是一种线性多糖聚合物 , 系从...
质粒dna在
琼脂糖凝胶
中应为一
条带
,但有时出现三条带的原因有哪些
答:
质粒DNA原则上是一
条带
,但通常跑胶会看到三条,这是正常情况。因为质粒是环形的DNA,稍有降解就会变成一条为线性,再厉害些,就成了线性DNA,三者在
琼脂糖凝胶
中速率不同,自然会出现三条带。标准就是三条带,有时候两条。因为质粒有不同的构象:超螺旋、环形、线形,
电泳
速度是不一样的。
琼脂糖凝胶电泳
质粒dna回收后验证出现杂
带怎么
回事?在线等
答:
出现杂带,一半要考虑做对照,了解杂带的来源。阴性对照,不加模板,看是否有
条带
,如果有,则反应体系污染。质粒对照,有些时候质粒本身带有的片段可能造成非特异扩增,所以放一个质粒空载体(只有载体,不带片段)做模板的质粒对照,如果这个能扩出来杂带,没有目标片段,基本就可以判断是由于载体的背景...
琼脂糖凝胶电泳
跑完,DNA
条带
颜色浅
怎么
回事
答:
琼脂糖凝胶电泳
跑完,DNA
条带
颜色浅怎么回事 原因有以下:1、 可以考虑是不是样品不纯,目的产物与杂带相差不大,所以要多跑一段时间才有尾巴。参考marker,marker应该不会有。如果有的话说明配胶有问题。2 、琼脂糖检测DNA一般去1~5微升原液,加2微升溴酚蓝便可,注意上样浓度;3、可能是原液浓度...
琼脂糖凝胶电泳
图上样孔中的
条带
跑不出来
怎么
回事?
答:
点样没点好或者制孔没制好,样品没提出DNA根据目的
条带
长度来调整
凝胶
浓度,一般1.5%左右,也不一定。紫外灯下没见带,不一定没有出孔,而是量少看不到,可以测一下浓度看一下,或直接试跑一下PCR。
电泳
时间可能过长,一般75v×30min左右,但是具体看溴酚蓝得离孔距离和目的条带离孔距离。利用...
琼脂糖凝胶电泳
NTC为什么出现
条带
,而且和实验孔在同一位置,求所有可 ...
答:
你是做PCR产物的
电泳
吧? 看来悲催了, negative control出来的
条带
多半是二聚体扩增出来的非特异性条带. 也就是说你的PCR失败了,建议提高PCR退火温度, 或者换引物再做尝试.`同时带上一个positive control (成功扩增过的模板和引物).不要迷恋于出来的那个条带, 那个条带应该比较模糊弥散而且并不特别...
你想
知道
的
琼脂糖凝胶电泳
答:
1、凝胶厚度和孔径大小 一般而言, 较厚的凝胶 运行过程中产生热量也较多,可导致
条带
扩散。 由于凝胶染色的高背景或凝胶染色和/或脱色所需时长(如进行
电泳
后染色 ),可能会出现可视化不佳的情况。 对于
琼脂糖 凝胶
,厚度以3 - 4 mm为佳,不推荐超过5 mm厚度的凝胶。 聚丙烯酰胺凝胶 的厚度由...
核酸
电泳
的结果跑出来的胶要
怎么看
答:
一般要根据要
电泳
分离的核酸的分子量大小:分子量大的核酸电泳时使用浓度较小的
凝胶
,分子量小的核酸电泳时使用浓度较大的凝胶.核酸在浓度越大的凝胶中电泳速度越小.如果胶浓度偏高,可能跑不动,如果胶浓度偏低,可能跑得太快,分不开.可以查到核酸分子大小与
琼脂糖
浓度范围的对应关系.
dna
电泳
的
条带
在紫外灯下能看见吗?
答:
dna电泳的条带在紫外灯下才能看,dna电泳的原理是不同长度的dna片段在同样电场力作用下,在
琼脂糖
胶中迁移的距离不同,长度越小迁移距离越快,也就是说片段越小越在胶的下部。一般跑dna电泳除了样品还要点上marker,他是由已知片段大小的若干条dna片段组成,由DNA
电泳条带
作为参照物,就能大致判断出...
琼脂糖凝胶电泳
Marker
条带
不直 弯得像月牙
怎么
办
答:
歪斜;3.考虑更换
电泳
缓冲液;4.电压不要太高,否则凝胶会受热。此外,跑出漂亮的琼脂糖电泳照片我有2个经验供参考:1.
琼脂糖凝胶
配好后在在槽子里先空跑十几分钟然后断电放置备用;2.老式槽子放凝胶位置的下方有一水箱,往里充入凉水,电泳时可降低凝胶的温度放置DNA
条带
变形。
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