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neb的酶和buffer用量
shRNA慢病毒载体合成步骤
答:
2. 沸水烧杯法 :把tube放在在PCR仪或沸水烧杯中95°C孵育4分钟,4min后将烧杯从火焰中取出,并让水自然冷却至室温。酶切体系:(这里用的是
NEB的酶和buffer
)①无酶ddH2O 或DEPC:补足至30uL ②plasmid:体积=5ug/质粒浓度 ③10X cutsmart:3uL ④限制性内切酶1:2uL ⑤限制性内切酶2:2uL ...
酶
切体系对质粒DNA浓度,
buffer
缓冲液,酶量有什么要求
答:
1. **DNA浓度**:DNA浓度通常需要在合理的范围内,以确保
酶
切反应的有效性。通常来说,DNA的浓度应在25 ng/µL到500 ng/µL之间,具体要求可能会根据酶的厂家和指南有所不同。如果DNA浓度太低,酶切可能不够有效;如果太高,可能导致酶切产生太多的片段。2. **
Buffer
缓冲液**:酶...
kpnI
与
EcoRI 双
酶
切体系所需缓冲液,是
NEB
公司的
答:
BUFFER
2 如果KPN1是HF的就用4
重组质粒更换载体
答:
将退火产物与线性化质粒进行T4连接
酶
连接,连接过夜。15ul 目标DNA片段(如果使用20ul,则14ul就可以)2ul 线性化质粒(如果使用50ul,3ul质粒)2μL 10x
NEB
T4 DNA ligase
buffer
1μL NEB T4 DNA连接酶 (16度 连接过夜)cheery 每个样品挑5个克隆 、ep管中加10uldd水 挑入克隆捶打混匀。...
SacI 和BamHI 双
酶
切 用什么
buffer
答:
楼主你用的是哪家公司的酶?
NEB的话,BamHI是用buffer2,,3,4 ,酶活性都是100%,SacI是buffer1,4,酶活性是100%
。所以双酶切的话用buffer 4 好了。其他公司的酶的话,可以查目录或者网上的资料,看每种酶在不同buffer中的酶活性,然后选双酶切的buffer。
关于PCR产物
酶
切
答:
NEB
每一种酶都随酶提供相应的最佳NE
Buffer
,以保证100%
的酶
活性。NEBuffer的组成及内切酶在不同缓冲液中的活性见《内切酶在不同缓冲液里的活性表》及每支酶的说明书。能在最大程度上保证两种酶活性的缓冲液即可用于双酶切。由于内切酶在非最佳缓冲液条件下的切割速率会减缓,因此使用时可根据每种酶在...
HindIII和EcoRI双
酶
切用
NEB
哪个缓冲液,还有BamHI 和HindIII双酶切用哪...
答:
推荐的是
buffer
3.1,但是这个buffer这两个酶都没带,而且因为在3.1中貌似活性都只有50%左右,所以
酶的用量
得增加,而且时间得加长。如果实在不行,就分别切好了。网页上表格看得比较清楚(https://www.
neb
.com/tools-and-resources/interactive-tools/double-digest-finder?enzyme1={2F6573A8-32BE...
NEB
高保PCR
酶
用加A吗
答:
博凌科为-为你解答:如果你是直接从DNA中克隆基因的话,设计一对引物,用高保真的Phusion或者Vent
酶
就可以。
NEB的
产品很不错。 如果你要从cDNA中克隆的话,考虑到RNA的降解,你不能使用一对引物来克隆。而是设计两对或者多对引物。比如,你你针对序列这几两对引物,前一对引物的下游,和后一对引物...
nebbuffer
是通用的吗
答:
是通用
的酶
切体系中各物质
neb酶
缓冲液
buffer
的作用:1.
NEB酶
为限制性内切酶,对目的片段特异性序列进行识别与酶切;2.
Buffer
的作用是维持反应体系的酸碱度的稳定。
NE
Buffer
是什么意思。
答:
NE
Buffer
意思是
NEB
(New England Biolabs)公司生产的能同时作为两种
酶
的公用
的buffer
。 就是这两种酶可以用同一种buffer,而酶的活性不会受影响。NEB(北京)有限公司 New England Biolabs (Beijing) LTD. NEB(北京)有限公司New EnglandBiolabs (Beijing) LTD. 为美国New England Biolabs,Inc.在华投资...
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