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neb的酶和buffer用量
在XhoⅠ和XbaⅠ限制性内切酶双
酶
切体系中,反应体系是什么?或者这两种酶...
答:
你可以在内切酶公司网站上查到推荐的反应体系:从图上看,这两个
酶
在不能再另一个酶的推荐
buffer
中使用,只能用2X Tango buffer进行双酶切,而从酶活性上来看,XbaI在2X Tango中,活性50-100%,而XhoI则是100%,所以如果两个酶要调整
用量
的话,XbaI需要是XhoI用量的2倍,但就是酶总量不能超过总...
怎样找BamHI和EcoRV
酶
切时可以兼容酶的缓冲液?
答:
哪家公司
的酶
啊 去公司网站上看下缓冲液选择就可以啦
NEB的
话应该是
buffer
4吧
双
酶
切体系一般怎么优化
答:
AFLP分析可以采用的内切酶有许多种,包括EcoRⅠ、HindⅢ、ApaⅠ、TaqⅠ、MspⅠ、HpaⅡ、MseⅠ、PstⅠ等,可以采用单
酶
切,也可以双酶切或三酶切,一般采用双酶切,其组合由一个高频内切酶(如MseⅠ,T/TAA)和一个低频内切酶(如EcoRⅠ,G/AATTC)组成。所采用内切酶组合最好根据生物体自身特点来决定:一般G+C含量较高...
怎么查找限制性内切酶
的酶
切效率?
答:
如果你用的是
NEB的酶
的话可以上下面这个网站查:http://www.neb.com/nebecomm/DoubleDigestCalculator.asp
neb的
phusion
酶
是在哪个国家生产的
答:
NEB
是美国的公司,理论上它的phusion高保真聚合
酶
应该是在美国生产的 但实际上因为成本的原因,其生产部门可能不完全在本土,而且很多产品未必需要自己生产而是可以外包出去。所以并不能确定该产品是在哪个国家生产的。中国,印度都有可能
双
酶
切分步两种不同的
buffer
会相互影响吗
答:
不同公司
的酶和buffer
命名和特性是不完全一样的。像takara公司的内切酶有一个双酶切的列表,列出了每两种酶双酶切最适用的buffer。像
NEB
公司的话,酶4种buffer中的活性都列出来了,选一个两种酶活性都高的就可以了。其他公司的产品也一样,主要是认真阅读说明书和产品资料。祝你好运。
neb和
takara内切酶哪个好
答:
看你要做啥了,像是对内切效果要求比较高的最好用
NEB的
~保真性好,一般不怎么会产生星号活性。比如AFLP,MSAP等,但是
酶
切时间较长。 Fermentas的优点是时间短,效率高,是快速内切酶,但是感觉还是效率没有NEB的好。
EcoRI和HpaI双
酶
切用哪种缓冲液?
答:
哪个公司的?如果是
NEB
(New England Biolabs)的话,我可以很负责的告诉你,用
buffer
4,因为我做过,OK。(可以无视EcoRI的星活性)。如果是其它公司的,你可以发消息告诉我,我再帮你想想。PS 用HpaI切后,连接的时候要时间长一些,推荐室温。
...但是这两种
酶
是不同公司的,一个takara一个
NEB
,有没有什么影响_百度...
答:
分开,因为
buffer
不同。可以先用效率高
的酶
切,回收后再用效率低的酶切,再回收,用于后续实验。
PCR反应中Taq
酶
最适温度为75度,为什么把仪器设为72度?
答:
关于复杂模板的扩增 对于模板结构复杂,如GC含量高(>60%),有二级结构等,普通的Taq
酶
可能难以延伸下去,加入DMSO等助熔剂可帮助扩增顺利进行,但DMSO有毒,而且
用量
需要优化。QIAGEN公司的任何一种Taq酶都附有特制的Q-溶液,操作方便、安全,对复杂模板的扩增特别有效。关于条件的优化 现下很多著名的...
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