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neb的酶和buffer用量
nebbuffer
是通用的吗
答:
是通用
的酶
切体系中各物质
neb酶
缓冲液
buffer
的作用:1.
NEB酶
为限制性内切酶,对目的片段特异性序列进行识别与酶切;2.
Buffer
的作用是维持反应体系的酸碱度的稳定。
NEB的酶
单位怎样转化为Weiss单位
答:
NEB的酶
是3.5U/weiss单位,通过计算酶催化的ATP中Pi的转移速率进行的计算
为什么要两种
酶
才能切割基因(两端要不同的限制酶),不能是同一种吗...
答:
虽然一种限制酶只能识别一种特定的氨基酸序列,但两种限制酶识别的序列可以相包含,例:酶A识别GGATCC序列,酶B识别GATC序列,则GGATCC序列就可以被两种限制酶切割。同步双酶切 同步双酶切选择能让两种酶同时作用的最佳缓冲液是非常重要的一步。
NEB
每一种酶都随酶提供相应的最佳NE
Buffer
,以保证100%
的酶
...
shRNA实验步骤
答:
将正反向干扰序列以10μM浓度溶于ddH2O,按以下体系将正反向干扰序列退火形成双链粘末端DNA: 10 μL Forward oligo 10 μL Reverse oligo 5 μL 10x
NEB
buffer
2 25 μL ddH2O 置于100度水,自然降温 AgeI HF+ EcoRI HF
酶
切pLKO.1载体质粒,体系如下:37°C孵育1.5h。(...
NE
Buffer
是什么意思。
答:
NE
Buffer
意思是
NEB
(New England Biolabs)公司生产的能同时作为两种
酶
的公用
的buffer
。 就是这两种酶可以用同一种buffer,而酶的活性不会受影响。NEB(北京)有限公司 New England Biolabs (Beijing) LTD. NEB(北京)有限公司New EnglandBiolabs (Beijing) LTD. 为美国New England Biolabs,Inc.在华投资...
Nhe1和EcoR1做双
酶
切的用什么
buffer
好。。
答:
这个要看是哪个公司买
的酶
,比如我买的是
NEB
公司的,Nhe1和Ecor1都用共同的
buffer
4,也就是随包送的smart buffer,这两种酶在buffer4里都是100%活性,所以选用这种。
连接
酶
主要在哪生有
答:
1个
NEB
单位等于0.015 Weiss单位,1 Weiss 单位等于 67 NEB单位。连接反应条件需要ATP,若在16℃反应,大约需4小时;若在4℃反应,则需反应过夜。2.E.coli DNA 连接
酶 与
T4 DNA ligase活性相似,但需烟酰胺-腺嘌呤二核苷酸(NAD+)参与,且其平端连接效率低,常用于置换合成法合成cDNA。作cDNA...
酶
切体系中各物质
neb
酶 缓冲液
buffer
的作用?
答:
1.
NEB
酶为限制性内切酶,对目的片段特异性序列进行识别
与酶
切;2.
Buffer
的作用是维持反应体系的酸碱度的稳定。
PCR体系配制时,50μl和20μl的体系各自具体物质和
用量
是多少啊?
答:
20ul 50ul 模板 1 1 dNTP 0.2 0.5 上游引物 0.15 0.45 下游引物 0.15 0.45
酶
0.2 0.5 10*
buffer
2 5 ddH2O 16.3 42.1 buffer 为对应酶所需要,一般为10 模板 有浓度的话200ng 无浓度就1ul
...的EcorI和Hind3是否可以进行双
酶
切,加什么
buffer
怎么查啊?能说的...
答:
可以啊 都是HF的用
BUFFER
4 不然的话用2
NEB
网站看一下不就行了
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