SDS-PAGE和western-blot有区别吗

Question

如题所述

Answer 1

前一个只是把蛋白进行电泳分析，主要用于蛋白纯度分析及分子量分析，主要用于定性；后者则是在前者的基础上又经过了转膜及杂交等步骤，用于分析特定蛋白的表达多少的。

Answer 2

SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)是目前最常用的分离蛋白质的电泳技术，通过把蛋白点样到凝胶上，进行电泳，再染脱色，最后结果显示蛋白的分子量。目前最快的方式，是使用预制胶，和eStain L1染色仪，半个小时就能看到结果（预制胶电泳20分钟，eStain L1 染脱色10min）。
Western-blot（蛋白免疫印迹）是一种将高分辨率凝胶电泳和免疫化学分析技术相结合的杂交技术，是检测蛋白质特性、表达与分布的一种最常用的方法。通过将电泳凝胶上的蛋白转移至pvdf膜或NC膜上，再加入与蛋白反应的一抗，再加入显示的二抗，最后显影。分析样本中，是否有蛋白的表达，表达的是什么蛋白，表达量大概有多少。目前最快2小时就能得到实验结果。使用SurePAGE预制胶进行20min电泳，用eBlot L1 快速湿转仪，10分内完成转膜，用eWestern转印仪，以及Western试剂盒，再显影，1.5小时。