99问答网
所有问题
western blot中sds-page胶在电泳前用染色吗
如题所述
举报该问题
其他回答
第1个回答 2016-04-10
不用,真不用,推荐看看分子生物学实验手册。
第2个回答 2016-04-05
好
相似回答
蛋白免疫印迹(
Western Blot
)详细操作步骤
答:
膜转移与显色: 蛋白从
电泳胶
转移到膜上,通常用丽春红
染色
检测。一抗和二抗孵育后,通过化学发光如ECL系统进行信号检测。具体步骤包括:细胞和组织裂解后,通过PBS清洗、裂解液添加和离心,确保蛋白酶抑制剂有效。
SDS-PAGE
技术中,蛋白结构通过SDS破坏,分子量由电泳迁移决定,聚丙烯酰胺凝胶则有不同浓度和...
sds-page电泳
测定蛋白质相对分子质量,分析看不到条带的地方是否有蛋白...
答:
SDS-PAGE电泳是一种将蛋白质按照分子量大小分离的方法,
通常需要使用染色方法(如Coomassie
blue染色)来观察电泳条带。如果某些样品在电泳后看不到条带,则可能是由于样品中蛋白质浓度太低或者电泳条件不合适导致的。此时,可以使用Western blot等方法来检测是否存在目标蛋白质。如果Western blot结果呈阳性,...
western
blotting
的原理、操作步骤及意义
答:
第一阶段为SDS—聚丙烯酰胺凝
胶电泳
(
SDS-PAGE
)。抗原等蛋白样品经SDS处理后带阴电荷,在聚丙烯酰膪凝胶中从阴极向阳极泳动,分子量越小,泳动速度就越快。此阶段分 离效果肉眼不可见(只有
在染色
后才显出电泳区带)。第二阶段为电转移。将在凝胶中已 经分离的条带转移至硝酸纤维素膜上,选用低电压(100V)和大电流...
western blot
具体操作步骤
答:
与Southern或Northern杂交方法类似,但
Western Blot采用
的是聚丙烯酰胺凝
胶电泳
,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过
PAGE
分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体...
实验干货 | 蛋白免疫印迹(
Western Blot
)从基本原理到实践操作步骤...
答:
揭开蛋白免疫印迹(
Western Blot
)的神秘面纱:原理、步骤详解 蛋白免疫印迹,一个揭示生命密码的生物技术工具,通过精密的
SDS-PAGE
分离,膜转移和抗体反应,将复杂的蛋白质世界简化在一张膜上。它的核心原理包括蛋白质
电泳
、膜吸附、免疫识别和信号检测,广泛应用于基因表达调控、抗体活性评估和疾病诊断的前沿...
SDS-PAGE
蛋白质
电泳
问题
答:
染色
后偏下方有紫色,我不清楚,只能认为是杂质……,灌
胶
漏了无所谓,只要凝固后分离胶能占全版的一半,就能用,兑
电泳
结果没影响。胶配好后混匀不难,手摇即可。初学
western
可以去丁香园看看视频,顺便学下
blot
,对于以后试验进行会有所帮助。传送门:http://bbs.bbioo.com/forum.php?mod=viewthread...
WesternBlot
基本原理及步骤
答:
Western blot
即蛋白质印迹法(免疫印迹试验),它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是将
电泳
分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到固相支持物NC膜或PVDF膜上,然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术,现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性...
sdspage电泳染色
的方法有哪些比较下限
答:
马斯亮蓝
染色
和银染。银染更灵敏,具体下限查分子克隆,蛋白量太少,用
westernblot
检测,更灵敏,可以检测到pg以及更低的浓度。
凝胶酶谱和
western blot
的区别?
答:
酶谱法的基本过程是先将样品进行SDS-聚丙烯酰胺(
SDS-PAGE
,含0.1%明胶)
电泳
分离,然后在有二价金属离子存在的缓冲系统中使样品中的 MMP-2(基质金属蛋白酶-2)和MMP-9 恢复活性,在各自的迁移位置水解凝胶里的明胶,最后用考马斯亮蓝将凝
胶染色
,再脱色,在蓝色背景下可出现白色条带,条带的强...
大家正在搜
western blot电泳电压
westernblot电泳原理
westernblot电泳液配方
western blot的应用
western blot用途
western blot制胶
western blot电压
western电泳中途暂停
westernblot显色原理