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Westernn blot和sds page的区别
如题所述
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推荐答案 2017-06-06
sds page的灵敏度不够,另外western可以特异性的检测目标蛋白,sds-page只能通过分子量大概的估计。
前一个只是把蛋白进行电泳分析,主要用于蛋白纯度分析及分子量分析,主要用于定性;后者则是在前者的基础上又经过了转膜及杂交等步骤,用于分析特定蛋白的表达多少的。
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答:
免疫印迹法(immuno
blotting
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Westernblot
。免疫印迹法(图1512)分三个阶段进行。第一阶段为SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(
SDSPAGE
)。抗原等蛋白样品经SDS处...
有人有
western
blot的
Tris-乙酸胶的配方吗?还有相关电泳液的配方?急...
答:
一、
SDS
-
PAGE
电泳所用溶液:1)30 %聚丙烯酰胺溶液 (100 mL)丙烯酰胺 (Arc) 29 g
N
,N’-亚甲双丙烯酰胺 (Bis) 1 g 用双蒸水定容至100mL,过滤备用,4℃存放 丙稀酰胺29.2g,N-N-甲叉双丙稀酰胺0.8g,加入去离子水定容至100mL,pH值不能超过7.0,过滤于棕色玻璃瓶中4℃贮存。2...
宝藏!转基因株系检测的
N
种方法
答:
SDS
-
PAGE
和
Western
blot
技术联手,通过蛋白电泳和抗体检测,揭示蛋白表达的动态变化,如FIE蛋白随春化时间的变迁(图7)。免疫层析试纸条,如图8所示,只需短短15分钟,即可快速鉴定抗性蛋白,其原理基于夹心法,以Bar蛋白检测为例(图9)。Southern blot,这位精准的拷贝数测量大师,通过酶切、电泳和杂交...
western
blot
中的CM是什么东西
答:
一p、原理 与mSouthern或Northern杂交方3法类似,但
Western
Blot
采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二n抗。经过
PAGE
分0离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上s,固相载体以1非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分1离的多肽类型及y其...
蛋白质的提取中如何确定目的蛋白?
答:
如果蛋白有纯化标签并且是过表达的话就比较容易判断,一般纯化过程中通过
SDS
电泳
不同
组分确定目的蛋白。如果没有纯化标签,一般是通过SDS电泳或者双向电泳和蛋白活性实验(如果蛋白有生物活性,比如酶),或者通过
western
blot
来确定目的蛋白。如果再想精确的话,就是
N
端测序或者做肽谱。
Western
blot的
结果可不可以送去做蛋白测序?
答:
Western
blot
转膜后的蛋白质是不可以进行蛋白质谱测序的。但是可以根据
western
blot结果对照
SDS
-
PAGE
胶,找出SDS-PAGE胶上相应蛋白条带的位置,再把蛋白胶条切下来进行质谱鉴定。另外,如果蛋白量足够大,纯度足够高的话,可以直接将PVDF膜上的蛋白条带剪下来进行
N
端edman测序。但是edman测序最多检测N端20...
什么是multiplicity of infection
答:
用
sds
page
电泳和hsternblot对感染
不同
时间后分泌的重组蛋白做时间表达分析,依此确定最适的感染复数( moi )和感染时间,以达到重组蛋白表达水平最适化,而后大规模进行重组蛋白的表达, sds page用来分析重组蛋白,
westernblot
用来在蛋白表达水平低的情况下检测表达的特异重组蛋白。
常见的融合蛋白表达标签有哪些呢?
答:
FLAG还作为标签蛋白,可以被抗FLAG的抗体识别,这样就方便通过
Western
Blot
、ELISA等方法对含有FLAG的融合蛋白进行检测、鉴定。.融合在
N
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血蓝蛋白的功能
答:
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PAGE
、
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