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酶切后纯化
琼脂糖凝胶电泳的DNA为什么要
酶切
答:
就要电泳把它们分开,把目的片段条带处的胶切下来,
纯化
,就得到大量的目的片段了。当然
我想做双
酶切
,但是这两种酶是不同公司的,一个takara一个NEB,有没有什...
答:
分开,因为buffer不同。可以先用效率高的
酶切
,回收后再用效率低的酶切,再回收,用于后续实验。
请问PCR后的
酶切
跑胶的原理和目的,谢谢。
答:
回收
纯化
得到目的条带,以用于下游的实验。
哺乳动物细胞蛋白表达
纯化
服务实验报告案例
答:
1.2、推荐客户使用钟鼎生物的自主载体pAZ-V5载体来进行实验,利用载体自带的V5信号肽序列帮助蛋白穿膜分泌表达至胞外,为了保持蛋白的N端活性,我们在C端添加6XHis-Tag便于重组蛋白的检测和亲和
纯化
。依据上述设计思路,以基因合成的方式构建pAZ-V5表达质粒,经过测序和
酶切
验证无误后,挑取无内毒素的质粒...
请问PCR后的
酶切
跑胶的原理和目的,谢谢。
答:
pcr后
酶切
是除去模板吧,用Dpn1酶切的吗,是这个就是除去甲基化的模板,然后肯定是要跑胶回收目的片段的啊
pcr产物不
纯化
直接
酶切
连接可以吗?PCR反应的buffer会不会对酶产生影响...
答:
理论可以,但是会影响效率。你到底是先
酶切
还是直接用T载体连接呢?
Nde I 单
酶切后
完全没条带了,怎么回事呢
答:
看着像是降解了,特别是6号,弥散状一片。从1号看
酶
应该没问题,那么也许是管子脏了、进了点水之类的。另外,6号点样孔发亮,可能有东西没跑下去。这种电泳质粒应该少加点,否则弱带看不清。
...小箭头所指分别为限制性内
切酶
EcoRI、BamHI的
酶切
位点,ampR为_百度...
答:
(1)由于含有目的基因的DNA片段和质粒上均含有EcoRI酶的切割位点,所以用此
酶切割后
产生相同的黏性末端.这样,具有相同黏性末端的片段用DNA连接酶均可连接,从而产生3种连接产物,目的基因-载体连接物、载体-载体连接物、目的基因-目的基因连接物,所以要进行分离
纯化
.(2)由于将细胞放入含四环素的培养...
ndei
酶切
难吗
答:
ndei
酶切
不难的 NdeI是常见限制性内切酶,类型是Type II restriction enzyme 识别序列(酶切位点)为:单酶切的条件一般为:双酶切或多酶切时,需选择适当的可以兼容两个或多个内切酶的缓冲液,然后参考上表设置反应体系。如果没有合适的缓冲液可以选择,可以在一种酶消化完毕后进行
纯化
,纯化完毕后再...
用XhoⅠ和NdeⅠ双
酶切
pET30a质粒总是只有一条带怎么回事??
答:
一条带就对了,要是没切开会有好几条带的,双
酶切后
的小片段太短了,只有大片段的百分之几,所以亮度也只有大片段的百分之几,仪器的灵敏度也是有限的,就像肉眼看不到细菌一样,看不到不表示不存在啊。
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