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蓝白斑筛选概念
蓝白
筛选
pcr的结果
答:
能够使得菌落清晰地显示蓝斑或者白斑。在
蓝白斑筛选
实验中,能够使得菌落清晰地显示蓝斑或者白斑,颜色对比明显,能够清晰辨别出目的菌落。蓝白斑筛选的原理分类生物科学蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法是根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。
有没有高人能告诉我
蓝白斑筛
的步骤,原理。谢谢。 有加分
答:
在这之前先说一下做
蓝白斑筛选
必备条件 (1)首先定义 LacZ:B(beta,打不出来,下同)-半乳糖苷酶 LacZ':含有B-半乳糖苷酶的启动子和5‘端的编码的a肽链。那么LacZ'是没有功能的(是指能表达没有功能的蛋白质),只有和失去正常氨基端(5'端)的B-半乳糖苷酶重新互补形成完整的B-半乳糖苷...
如何提高杆状病毒的重组效率
蓝白斑筛选
答:
当培养液中加入IPTG,IPTG可以和乳糖操纵子下游的的阻遏蛋白结合,使阻遏蛋白从DNA上脱离,激活半乳糖苷酶的表达。因而重组质粒可以利用x-gal而感受态不能。这个是
蓝白斑筛选
的主要原理。结果中白斑表示重组质粒表达的菌体,蓝斑表示未表达。至于氨苄筛选,通常不会利用氨苄抗性进行筛选,因为感受态中是否有...
蓝白斑筛选
的平板4°可以防止多长时间
答:
蓝白斑筛选
是重组子筛选的一种方法:是根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入 ...
改进
蓝白斑筛选
重组子改进的方法
答:
蓝白斑2次筛选。
蓝白斑筛选
是基因工程中比较常用的一种细菌重组子的筛选方式,改进蓝白斑筛选重组子改进的方法是蓝白斑2次筛选,在抗生素筛选基础上的第2次筛选,是根据载体的遗传特征筛选重组子。
简述α互补和
蓝白斑筛选
的原理
答:
载体pGEMZ在β-半乳糖苷酶(lacZ)的α-肽编码区内具有多克隆区域。在重组质粒中插入片段使α-肽失活,可在指示平板上通过颜色
筛选
鉴别。不带有插入片段的载体,表达有功能的β-半乳糖苷酶,所用的宿主菌在染色体或附加体上缺失掉lacZM15基因,导致内源α-肽失活。载体pGEMZ或其它含lacZ基因的α-...
α-互补与
蓝白斑筛选
的关系
答:
二者相同。细菌的篮
白斑筛选
又称α互补法,是根据组织化学的原理来筛选重组体的方法。α互补可在指示平板上通过颜色筛选鉴别。
蓝白斑
选择中重组体和空载体的颜色分别是什么
答:
在该筛选方法中重组体和空载体的颜色分别是白色和蓝色。在
蓝白斑筛选
中,使用的培养基含有X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷),这是一种可以被β-半乳糖苷酶切割的底物,切割后会产生深蓝色的物质5-溴-4-靛蓝,使菌落呈现蓝色。对于空载体(即未插入外源DNA的质粒),当其在宿主细胞(...
比较
蓝白斑筛选
法与插入失活法筛选的优缺点
答:
插入失活法在含抗性培养基中培养后并不能直接得到所需的重组体。而是需要进行菌落平板的影印复制, 才能够将所需的重组体挑选出来。
蓝白斑筛选
可以直接通过颜色判断抗性培养基中的所需重组体,并且两种抗性可以在同一培养基中同时筛选,大大提高了效率。蓝白斑筛选的所需工程菌为β半乳糖苷酶缺陷型菌株。
抗生素的
蓝白斑
插入失活
筛选
的原理。
答:
可使菌落或噬菌斑呈兰色 你的空载提转进去的话,IPTG诱导lacZ' 表达α肽,互补体内缺陷的酶,然后可降解底物X-gal,产生蓝斑;如果你则载体的多克隆位点插入了片段,导致编码的α肽错误,或者不能编码α肽,也就不能产生正常功能的酶,无法分解X-gal,所以长
白斑
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