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比较蓝白斑筛选法与插入失活法筛选的优缺点
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第1个回答 2016-06-06
插入失活法在含抗性培养基中培养后并不能直接得到所需的重组体。而是需要进行菌落平板的影印复制, 才能够将所需的重组体挑选出来。蓝白斑筛选可以直接通过颜色判断抗性培养基中的所需重组体,并且两种抗性可以在同一培养基中同时筛选,大大提高了效率。蓝白斑筛选的所需工程菌为β半乳糖苷酶缺陷型菌株。
第2个回答 2016-05-27
白癜风不会传染。白癜风是一种常见多发的色素性皮肤病,该病以局部或泛发性色素脱失形成白斑为特征,是一种获得性的,皮肤色素脱失形成的白色斑片,皮肤中黑素细胞的数量的减少甚至消失导致白癜风的发生,具体的机制并不明确。
相似回答
蓝白斑筛选
答:
蓝白斑筛选的
机理 由α-互补产生的Lac+ 细菌较易识别,它在生色底物X-gal(5-溴-4氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)下存在下被IPTG(异丙基硫代-β-D-半乳糖苷)诱导形成蓝色菌落。当外源片段插入到载体的多克隆位点上后会导致读码框架改变, 表达蛋白
失活
, 产生的氨基酸片段失去α-互补能力, 因此在同...
重组子的重组子 - 重组子的
筛选
答:
本实验利用抗生
筛选
转化子。 2、互补法:至今使用的许多载体(如PUC系列)有含有一个大肠杆菌DNA的短区段,其中含有β-半乳糖苷酸基因(lacZ)的调控序列和头146个氨基酸偏码区。这个偏码区中插入一个多克隆位点。受体菌则含编码β-半乳糖苷酶C端aa的序列。当外源基因插入时,二者溶为一体后,有β...
如何用抗生素
插入失活法和
IacZ基因
插入失活法筛选
转化子?
答:
lacZ基因插入法就是在lacZ基因上插入外源DNA片段,重组质粒中lacZY基因被破坏,不能分解底物产生蓝色菌落,形成白斑。因此通过
蓝白斑
就能大致确定重组转化子。 抗生素
插入失活法
就是抗生素基因上插入外源DNA片段,重组质粒中抗生素抗性基因被破坏,不能抗相应的抗生素不能生长。因此将转化子复制在有无相应抗生素...
未导入目的基因之前,质粒上已经有标记基因
答:
则目的基因插入质粒使得重组质粒相应的抗性基因失活,所以含有重组质粒的宿主细胞不能在含有该抗生素的选择培养基上生长,而普通质粒因抗性基因没有失活,所以含有普通质粒的宿主细胞能在含有该抗生素的选择培养基上生长,这样既可检测出含有目的基因的重组体克隆,这种方法叫
插入失活法
。
简述α互补
和蓝白斑筛选的
原理
答:
在重组质粒中插入片段使α-肽
失活
,可在指示平板上通过颜色
筛选
鉴别。不带有插入片段的载体,表达有功能的β-半乳糖苷酶,所用的宿主菌在染色体或附加体上缺失掉lacZM15基因,导致内源α-肽失活。载体pGEMZ或其它含lacZ基因的α-肽互补细菌,具有β-半乳糖苷酶的ω片段,所得功能β-半乳糖苷酶(α...
如何把导入了目的基因的受体细胞
筛选
出来?
答:
导入时用的运载体上如果有抗性基因(标记基因),就可以通过检测抗性基因的表达来检测,比如运载体PBR322 就带有抗四环素基因和抗氨卞青霉素基因 要么就等目的基因在受体细胞中表达以后,然后根据特定的性状来区分
重组基因
筛选的
具体做法是?
答:
先通过限制性内切酶把目的基因和标记基因切出黏性末端然后用DNA连接酶连接到具有相同黏性末端(用同种限制性内切酶切)运载体(一般是质粒后灭活病毒)将它们导入受体细胞。抗性基因,抗生素基因等都在质粒上,关于目的基因的进入会破坏原有的质粒基因一说,不能赞同。能使基因
失活的
是限制性内切酶把基因从中...
标记基因的作用质粒上有两个或两个以上标记基因的作用是什么?_百度...
答:
如果细菌把质粒丢了,细菌便不能抗氨苄而被杀死)。而LAC Z基因是为我们插入目的基因筛选而用的。LAC Z基因本身在IPTG和x-gal的作用下,而产生兰斑。而且这个基因上有很多的酶切位点,方便我们插入自己想要的基因。而我们的基因插入后,把LAC Z基因破坏了,不能产生兰斑。这就是兰
白斑筛选
。
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蓝白斑筛选只有白斑
蓝白斑筛选优点
IPTG在蓝白斑筛选的作用
蓝白斑筛选IPTG
蓝白斑筛选步骤
蓝白斑筛选实验
蓝白斑筛选浓度
蓝白斑筛选原理图解
失活剂
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