如何提高杆状病毒的重组效率蓝白斑筛选

如题所述

第1个回答  推荐于2016-03-08
在重组质粒表达的实验中,蓝白班筛选是要检测重组质粒是否表达,而氨苄的加入主要是为了防止培养过程中染菌。
对于半乳糖苷酶活性筛选,首先重组质粒所选的质粒与野生型(感受态)不同,上面有多克隆位点,蛋白标签,和多对操纵子、启动子,其中就包括乳糖操纵子。当培养液中加入IPTG,IPTG可以和乳糖操纵子下游的的阻遏蛋白结合,使阻遏蛋白从DNA上脱离,激活半乳糖苷酶的表达。因而重组质粒可以利用x-gal而感受态不能。这个是蓝白斑筛选的主要原理。结果中白斑表示重组质粒表达的菌体,蓝斑表示未表达。
至于氨苄筛选,通常不会利用氨苄抗性进行筛选,因为感受态中是否有氨苄抗性基因很不确定,无法得到准确的结果本回答被提问者和网友采纳
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