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简述蓝白斑筛选原理
蓝白斑筛选
答:
蓝白斑筛选的机理
由α-互补产生的Lac+ 细菌较易识别
,它在生色底物X-gal(5-溴-4氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)下存在下被IPTG(异丙基硫代-β-D-半乳糖苷)诱导形成蓝色菌落。当外源片段插入到载体的多克隆位点上后会导致读码框架改变, 表达蛋白失活, 产生的氨基酸片段失去α-互补能力, 因此在同...
蓝白斑筛选
的
原理
是什么?
答:
而当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地破坏α片段的编码,使得带有重组质粒的LacZ-细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选,称为
蓝白斑筛选
。
举出3种基因文库的构建中重组子的
筛选
方法并
简述
其
原理
答:
蓝白斑筛选的原理
分类:生物科学蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法: 是根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等
。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS)...
基因工程中
蓝白斑筛选
的
原理
是什么
答:
由α-互补而产生的LacZ+细菌在诱导剂IPTG(异丙基硫代半乳糖苷)的作用下
,在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落。而当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地破坏α片段的编码,使得带有重组质粒的LacZ-细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选,称为蓝白斑筛选。
蓝白斑筛选
的
原理
是什么
答:
蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法,是根据载体的遗传特征筛选重组子,主要为α-互补与抗生素基因
。蓝白斑筛选在指示培养基上,未转化质粒的菌落因无抗生素抗性而不能生长,重组质粒的菌落是白色的,非重组质粒的菌落是蓝色的,以颜色不同为依据直接筛选重组克隆的方法。一些载体(如PUC系列质粒)带有β-半...
简述
α互补和
蓝白斑筛选
的
原理
答:
在重组质粒中插入片段使α-肽失活,可在指示平板上通过颜色
筛选
鉴别。不带有插入片段的载体,表达有功能的β-半乳糖苷酶,所用的宿主菌在染色体或附加体上缺失掉lacZM15基因,导致内源α-肽失活。载体pGEMZ或其它含lacZ基因的α-肽互补细菌,具有β-半乳糖苷酶的ω片段,所得功能β-半乳糖苷酶(α...
在含有x-gal 和iptg 的
筛选
培养基上,为什么会长出蓝色菌落,和白色菌 ...
答:
因而易于识别。然而,当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地导致无α-互补能力的氨基端片段,使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选,又称为
蓝白斑筛选
。如用蓝白斑筛选则经连接产物转化的钙化菌平板37℃温箱倒置培养12-16hr后,有重组质粒的细菌形成白色菌落。
蓝白
筛选
pcr的结果
答:
能够使得菌落清晰地显示蓝斑或者白斑。在蓝白斑筛选实验中,能够使得菌落清晰地显示蓝斑或者白斑,颜色对比明显,能够清晰辨别出目的菌落。
蓝白斑筛选的原理分类生物科学蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法是根据载体的遗传特征筛选重组子
,如α-互补、抗生素基因等。
蓝白斑筛选
问题!!
视频时间 00:48
如何提高杆状病毒的重组效率
蓝白斑筛选
答:
当培养液中加入IPTG,IPTG可以和乳糖操纵子下游的的阻遏蛋白结合,使阻遏蛋白从DNA上脱离,激活半乳糖苷酶的表达。因而重组质粒可以利用x-gal而感受态不能。这个是
蓝白斑筛选
的主要
原理
。结果中白斑表示重组质粒表达的菌体,蓝斑表示未表达。至于氨苄筛选,通常不会利用氨苄抗性进行筛选,因为感受态中是否有...
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