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简述蓝白斑筛选原理
蓝白斑筛选
的平板4°可以防止多长时间
答:
蓝白斑筛选
是重组子筛选的一种方法:是根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入 ...
分子生物学,名词解释
答:
亮氨酸拉链(leucine zipper):出现在DNA结合蛋白质和其它蛋白质中的一种结构基元(motif)。当来自同一个或不同多肽链的两个两用性的α-螺旋的疏水面(常常含有亮氨酸残基)相互作用形成一个圈对圈的二聚体结构时就形成了亮氨酸拉链
蓝白斑筛选
是一种基因工程常用的重组菌筛选方法。野生型大肠杆菌产生...
α-互补与
蓝白斑筛选
的关系
答:
二者相同。细菌的篮
白斑筛选
又称α互补法,是根据组织化学的
原理
来筛选重组体的方法。α互补可在指示平板上通过颜色筛选鉴别。
蓝-白斑筛选
蓝白斑筛选
试验
答:
蓝-
白斑筛选
实验所需材料和步骤详解:试剂:X-gal: 2%母液(二甲基甲酰胺配置,存于-20℃的铝箔或黑纸包裹容器中),工作浓度为20ul/20ml平板。氨苄青霉素(Amp): 100mg/ml母液,存于-20℃冰箱,工作浓度100ug/ml。IPTG: 100mmol/L母液,同样存于-20℃,使用时取40ul/20ml平板。LB培养基: 1%蛋白...
改进
蓝白斑筛选
重组子改进的方法
答:
蓝白斑2次筛选。
蓝白斑筛选
是基因工程中比较常用的一种细菌重组子的筛选方式,改进蓝白斑筛选重组子改进的方法是蓝白斑2次筛选,在抗生素筛选基础上的第2次筛选,是根据载体的遗传特征筛选重组子。
蓝白斑筛选
问题
答:
那么,那些带一点蓝色的
白斑
你有没有做菌液PCR呢?或者测序呢?我以前有见过带点蓝色的白斑,其实也是蓝斑。没有白斑的原因,要么是没连上,要么是没转化成功。从连接产物,到菌种都排查一下吧!
TA克隆
蓝白斑筛选
答:
1、可能你的感受态细胞都死亡了,根本就没有活菌,就不长了。2、可能是没连接上,没有就没有完整的载体转入感受态细胞,自然也不会生长。3、可能用的抗生素不对,抗生素与耐药载体不符合,也不会生长。4、抗生素量太大,培养是时间太短,细菌还没有长起来。5、涂布时,玻璃棒太热,把细菌都烧死了。
e.coli jm109属于什么系列
答:
DH5a E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。可用于
蓝白斑筛选
鉴别重组菌株。JM109菌株 该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时,由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α-互补,从而显示β-半乳糖苷酶...
关于连接,转化,
蓝白斑筛选
的问题
答:
1 SolutionI和你待连接的样品最佳比例是1:1,即各5微升。2 连T的片断最好是新鲜的PCR样品,防止A degradatio。3 你可以考虑调整一下连接温度,查查相关产品的说明。
...大虾帮帮忙,选择什么酶切位点和如何
筛选
重组的载体?
答:
蓝白斑筛选
不需要基因插入LAC-Z处,你也插不进去,在克隆位点(各种内切酶的位点)插入就可以达到筛选的目的了,你仔细看一下蓝白斑筛选的
原理
就知道了。我手头上只有pGEX3和5的载体的资料,但是估计跟4是差不多的。GST区域在那些克隆位点的上游。不知道你说的鉴定是什么意思?是用GST上的引物进行PCR...
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