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简述蓝白斑筛选原理
蓝白斑筛选
,但涂板过夜培养后什么都没长,这是什么原因呢?
答:
过敏了 谢谢
α互补
筛选
的
原理
是什么?
答:
由α-互补而产生的LacZ+细菌在诱导剂IPTG的作用下,在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落,因而易于识别。然而,当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地导致无α-互补能力的氨基端片段,使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选,又称为
蓝白斑筛选
。如用蓝白斑筛选则经连接产物...
蓝白斑筛选
过程中,T载体:DNA=1:4,DNA为PCR纯化产物,连接条件4度过夜过...
答:
--
蓝白斑筛选
过程中,T载体:DNA=1:4,DNA为PCR纯化产物,--如果是摩尔比没什么问题。其实只要目的片段摩尔数高于载体就会有很好的结果。但是如果产物量太大,则会有不良的效果。根据你的问题 1:检测纯化产物。出了问题后纯化产物一定要走电泳查看,确认回收效率。2:连接的产物量不用太大。3000bp的T...
pet28a可以
蓝白斑筛选
吗
答:
pet28a不可以
蓝白斑筛选
。pet28a不可以蓝白斑筛选,因为没有lacZ的alpha片段编码基因。
做完
蓝白斑筛选
后菌体一般要灭菌后再刷洗培养皿
答:
首先X-gal要避光保存,以免失效;其次培养时间确定够吗?我们前两天做的,也全是
白斑
,又培养了四个小时,总共20h,就有蓝斑出现了(我用的是大肠杆菌)
β–半乳糖苷酶的α–互补性
原理
是什么
答:
蓝白斑筛选
的
原理
分类:生物科学蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法: 是根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS)...
GFP
筛选原理
答:
这种重组子的筛选,又称为
蓝白斑筛选
。如用蓝白斑筛选则经连接产物转化的钙化菌平板37℃温箱倒置培养12-16hr后,有重组质粒的细菌形成白色菌落。筛选氨苄青霉素抗性的阳性克隆很简单,将氨苄青霉素加到所用培养基中,终浓度100ug/ml,把要筛选的菌液涂布其上,能长出的就是氨苄青霉素阳性菌株。要注意的...
组成型突变株的
筛选原理
和方法
答:
组成型突变株在一定的条件下是致死的,可以通过这个特性来进行
筛选
。
基因克隆中a-互补选择
原理
是什么
答:
生物科学
蓝白斑筛选
是重组子筛选的一种方法: 是根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS),它并不破坏读框,但...
蓝白斑筛选
中的蓝斑是什么? 是载体自连产物吗?
答:
载体上的是β-半乳糖苷酶基因(lacZ),他能使细菌表达β-半乳糖苷酶,该酶可以将X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-d-半乳糖)降解,产生显色底物,然后我们就能看到蓝色
斑
。
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