做完PCR和酶切后为什么要做纯化？

如题所述

举报该问题

推荐答案 2011-07-22

因为你做pcr和酶切都会引入很多试剂啊离子啊什么的可能影响后一步实验而且你做酶切后不纯化的话切下来的片段还在那里可能发生自连

温馨提示：答案为网友推荐，仅供参考

当前网址：http://99.wendadaohang.com/zd/vj7tBX7jv.html

第1个回答 2011-07-22

有很多缓冲液及非目的小片段，会干扰后续试验

第2个回答 2011-07-22

看后续试验，也不一定都需要纯化~

相似回答

DNA跑完胶后为什么要进行纯化答：一般不能。纯化除去的是taq酶、金属离子和ddNTP等，还有就是要除去非特异性扩增的条带。有时候你虽然看不见那些条带，但是实际上是存在的。

双酶切时,PCR样为何需纯化?答：首先，你用的是质粒模板；其次，你扩增得到的非单一条带，如果不纯化直接酶切，那么得到的将是带有相应酶切位点的几种片段，继续试验的话，菌落PCR鉴定时可能会出现几种不同大小的条带，运气好的话也会有阳性克隆。你也可以做个试验尝试下。

PCR产物酶切后需要纯化,我们是用的试剂盒,但是试剂盒纯化的原理是什么呢...答：PCR产物酶切后跑胶，不是有你需要的条带么，你看大小切出你需要的条带，试剂盒只是把你切出的胶质里的DNA回收回来柱子黏附的是DNA 不懂可以追问

pcr纯化试剂答：PCR产物纯化是去除多余的dNTP和引物二聚体。用纯化好的片段连接转化可以降低背景，提高转化效率。通常转化后我们用几种方法来确认转化子，抽质粒酶切是比较可靠的。选择酶切大小与预计一致的克隆去测序。

请问PCR后的酶切跑胶的原理和目的,谢谢。答：回收纯化得到目的条带，以用于下游的实验。

1、为什么质粒酶切产物需要电泳后再胶回收,而不是直接进行酶连答：您想问的是为什么质粒酶切产物需要电泳后再胶回收，而不是直接进行酶连的原因吗？分离和纯化、去除残留的酶、提高酶连效率。1、分离和纯化：电泳能够有效地将酶切产物分离，通过凝胶电泳可以将不同大小的DNA片段分开。胶回收则能够进一步纯化所需的DNA片段，去除存在的杂质和小片段。2、去除残留的酶：在...

转化大肠杆菌之前用了PCR纯化,会不会有影响答：如果你指的是PCR产物，在酶切和连接之前做了纯化，这往往是必要的（如果条带单一，纯度好，酶切和连接体系成熟，也可以不纯化）；如果是在连接试验后，再用试剂盒纯化一次，这会对实验有很大的影响：1、纯化过程本身会有较大损失，起始量约少，相对损失就越大；2. pcr的纯化试剂盒往往是针对小片段...

用于与载体连接的pcr酶切产物是如何纯化的、、答：跑胶后找到目的片段,切胶回收,纯化的传统法就是将PCR产物加入2倍体积的乙醇－20度沉淀过夜后低速短暂离心（如 3000rpm离心1~2min),弃掉上清,然后用70%乙醇洗涤一次后,弃掉乙醇,放干后再用无菌水或者TE溶解.当然这种方法对PCR产物纯化后回收率是很低的,你需要多做几管PCR,然后一起纯化回收.但是现在...

pcr产物纯化试剂盒可用于纯化酶切后的质粒吗?答：PCR产物纯化试剂盒通常是针对PCR扩增后的DNA进行纯化的，这些试剂盒的原理通常包括DNA吸附柱、分子筛、离子交换层析、亲和层析等，通过这些原理可以将PCR扩增后的DNA从样品中分离出来。酶切后的质粒是已经经过酶切处理的DNA片段，其长度和序列与PCR产物不同。因此，PCR产物纯化试剂盒通常不适用于纯化酶切后...

大家正在搜

纯化后酶切还是酶切后纯化 PCR产物直接酶切然后纯化酶切后的产物为何必须进行纯化 pcr产物为什么要纯化酶切后纯化酶切产物纯化酶切产物纯化效率低酶切产物回收纯化酶切产物纯化浓度低

做完PCR和酶切后为什么要做纯化？

双酶切时，PCR样为何需纯化？

质粒提取与纯化的区别做酶切的质粒需要做纯化吗

PCR扩增出目的片段之后为什么要酶切？酶切下来的是目的片段和...

做基因多态性，PCR产物必须纯化后才能酶切吗

DNA跑完胶后为什么要进行纯化PCR后的DNA

PCR反应后为什么要酶切,就是那个酶切的目的是什么

如果PCR产物可以直接用来测序，但为什么还需要买PCR产物纯...