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2ã ç¼èç³åè¶çµæ³³ ï¼ç¼èç³åè¶çµæ³³æ¯ä¸ç§ä»¥ç¼èç³åè¶ä¸ºæ¯æç©çåè¶çµæ³³,å
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¥åå¦åºå¢ç¾ä¹åº,åå¯ä½¿ç¼èç³å¨65âå·¦å³ä¾¿è½çå,被称为ä½çç¹ç¼èç³.该温度ä½äºDNAççç¹,èä¸åè¶å¼ºåº¦åæ ææ¾æ¹å.以æ¤ä¸ºæ¯æç©è¿è¡çµæ³³,称为ä½çç¹ç¼èç³åè¶çµæ³³,主è¦åºç¨äºDNAç 究.å¦DNAé´å®,DNAéå¶æ§å
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°èºåè¶çµæ³³(ç®ç§°PAGE).åºç¨èå´å¹¿,å¯ç¨äºèç½è´¨ãé
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¸ççç©å¤§ååçå离ãå®æ§ãå®éåå°éçå¶å¤,è¿å¯æµå®ååéãççµç¹ç.
4ãççµèç¦çµæ³³ ï¼ççµèç¦çµæ³³æ¯å©ç¨å
·æpH梯度ççµæ³³ä»è´¨æ¥å离ççµç¹(pI)ä¸åçèç½è´¨ççµæ³³ææ¯.è¿æ¯å
å年代åææåå±èµ·æ¥çæ°ææ¯,åºæ¬åçæ¯å¨å¶å¤èä¸ç¯èºè¶åè¶æ¶,å¨è¶çæ··å液ä¸å å
¥è½½ä½ä¸¤æ§çµè§£è´¨(åååAmpholine).è¿ç§è½½ä½ä¸¤æ§çµè§£è´¨æ¯ä¸ç³»åå«æä¸åæ¯ä¾æ°¨åºå羧åºç氨羧é
¸æ··åç©,å
¶ååéå¨300ï½1000èå´å
,å®ä»¬å¨pH2.5ï½11.0ä¹é´å
·æä¾æ¬¡éåä½ç¸è·å¾è¿çççµç¹,并ä¸å¨æ°´æº¶æ¶²ä¸è½å¤å
å溶解.å«æè½½ä½ä¸¤æ§çµè§£è´¨çåè¶,å½é以ç´æµçµæ¶,è½½ä½ä¸¤æ§çµè§£è´¨å³å½¢æä¸ä¸ªä»æ£æå°è´æè¿ç»å¢å çpH梯度.å¦ææèç½è´¨å 人æ¤ä½ç³»ä¸è¿è¡çµæ³³æ¶,ä¸åçèç½è´¨å³ç§»å¨å¹¶èç¦äºç¸å½å
¶ççµç¹çä½ç½®.好çè½½ä½ä¸¤æ§çµè§£è´¨åºå
·æ以ä¸ç¹ç¹ï¼å¨ççµç¹å¤æ足å¤çç¼å²è½å,ä¸æè¢«æ ·åçæ¹åå
¶pH梯度ï¼å¿
é¡»æååç足å¤é«ççµå¯¼,以便使ä¸å®ççµæµéè¿ï¼ååéä¸å®å¤ªå¤§,便äºå¿«éå½¢æ梯度并ä»è¢«å离çé«ååç©è´¨ä¸é¤å»ï¼ä¸ä¸è¢«å离ç©è´¨åçåå¦ååºæ使ä¹åæ§ç.Ampholineæ¯ä¸ç§å¸¸ç¨çè½½ä½ä¸¤æ§çµè§£è´¨.è¦åå¾æ»¡æçççµèç¦çµæ³³å离ç»æ,é¤æ好çè½½ä½ä¸¤æ§çµè§£è´¨å¤,è¿åºææ对æµçæªæ½,使已å离çèç½è´¨åºå¸¦ä¸è´åçåæ··å.è¦æ¶é¤è¿ç§ç°è±¡,åæ³ä¹ä¸å å
¥æ对æµä»è´¨,ç¨å¾æå¤çæ对æµæ¯æä»è´¨æ¯èä¸ç¯é
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·ææ´å¥½çæµç¼©æåº,å¾ç¨çæ ·åä¹å¯è¿è¡å离,并ä¸å¯ç´æ¥æµåºèç½è´¨çççµç¹.æ以æ¤ææ¯å¨é«ååç©è´¨çå离ãæ纯åé´å®ä¸çåºç¨æ¥ç广æ³.ä½æ¯ççµèç¦çµæ³³ææ¯è¦æ±æ稳å®çpH梯度å使ç¨æ ç溶液,èå¨æ ç溶液ä¸èç½è´¨æåçæ²æ·.
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