怎么算蛋白质等电点的ph值啊?

如题所述

等电点的计算如下:

等电点是总电荷为零的状态,那么就不应该按单个赖氨酸来计算,而是应该将3个放在一起,就是说一个氨基,一个羧基,加上3个赖氨酸侧链总电荷为零。因为lys是碱性AA,在等电点状态下,氨基不带电,羧基带一个负电荷,那么每个侧链就说三分之一解离。既是带三分之一正电荷。

这个三肽在等电点时,羧基带一个负电荷,三个侧链氨基一共带一个正电荷,与羧基平衡。所以每个侧链氨基带1/3个正电荷,套用公式:pI=pka+lg(碱/酸),就得出pI=10.54+lg2=10.841。

一、等电点

等电点是一个分子表面不带电荷时的pH值。是针对带电荷的物质而言,不只限于两性电解质如氨基酸和蛋白质。当然,蛋白质是两性电解质,其等电点和它所含的酸性氨基酸和碱性氨基酸的数量比例有关。各种蛋白质因氨基酸残基组成不同,等电点也不一样。

当溶液在某一特定pH值的条件下,蛋白质所带正电荷与负电荷恰好相等(总净电荷为零) 时,在电场中既不向阳极移动,也不向阴极移动。因此利用电泳的方法可以确定蛋白质的等电点,也可以将不同带电性质和不同大小、形状的蛋白质分子进行分离纯化。

蛋白质在等电点时,因为没有相同电荷而互相排斥的影响,所以最不稳定,溶解度最小,极易借静电引力迅速结合成较大的聚集体,因而沉淀析出。同时蛋白质的黏度、渗透压、膨胀性以及导电能力均为最小。

二、区别酸碱

氨基酸具有氨基和羧基的典型反应,例如氨基可以羟基化、酰基化,可与亚硝酸作用;羧基以成酯或酰氯或酰胺等。此外,由于分子中同时具有氨基与羧基,还有氨基酸所特有的性质。

氨基酸分子中既含有氨基,又含有羧基,所以氨基酸与强酸强碱都能成盐,氨基酸是两性物质,本身能形成内盐。氨基酸的高熔点(实际为分解点)、难溶于非极性有机溶剂等性质说明氨基酸在结晶状态是以两性离子存在的。

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