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双酶切体系buffer表
Xho1和Nde1 50μl
双酶切
反应
体系
的配制??
答:
由这两种酶组成的
双酶切体系
并不需要添加BSA,请你仔细核对,两种酶的最适反应温度均为37摄氏度所以双酶切温度应为37摄氏度。如果选用TaKaRa的限制性内切酶那么
Buffer
应使用H Buffer,对于50 μl的酶切体系而言应分别加入1.5 μl的Xho1和Nde1并且加入5 μl的10×H Buffer(使得酶切体系中的Buffer...
Takara的NheI 和BamHI
双酶切体系表
中没有双酶切缓冲体系应该如何选用缓 ...
答:
1、如果你用的是Takara的
酶
,应该就只能分步了,而且BamHI还是30度反应,虽然也可以在37度切,但如果是分步切的话还是用30度吧。2、为什么不用NEB的酶呢?可以用
buffer
1或2同时切(好像是,你需要自己再确认下),而且NEB的这两种酶都有HF酶,效率更高,都可以在buffer4中达到100%的效率。以上,...
在XhoⅠ和XbaⅠ限制性内切酶
双酶切体系
中,反应体系是什么?或者这两种酶...
答:
你可以在内切酶公司网站上查到推荐的反应
体系
:从图上看,这两个酶在不能再另一个酶的推荐
buffer
中使用,只能用2X Tango buffer进行
双酶切
,而从酶活性上来看,XbaI在2X Tango中,活性50-100%,而XhoI则是100%,所以如果两个酶要调整用量的话,XbaI需要是XhoI用量的2倍,但就是酶总量不能超过总...
20ul
双酶切体系
和10ul双酶切体系的区别
答:
1、产物浓度不同 20ul
双酶切体系
比10ul双酶切体系产物的浓度高。2、DNA反应量不同 20ul双酶切体系所含DNA要比10ul双酶切体系含有的DNA多,进行双酶切时所要切的DNA量也不同。研究中常用的双酶切体系就是20ul双酶切体系和10ul双酶切体系,二者除了调配比例之外,所用的酶是相同的,所以反应...
Nhe1和EcoR1做
双酶切
的用什么
buffer
好。。
答:
这个要看是哪个公司买的
酶
,比如我买的是NEB公司的,Nhe1和Ecor1都用共同的
buffer
4,也就是随包送的smart buffer,这两种酶在buffer4里都是100%活性,所以选用这种。
Ecor1 和 Nco1
双酶切体系
的配制
答:
你用的是哪个公司的酶? 不同公司的
buffer
不一样的。不过,对于一般的体系,可以选择10微升体系或20微升体系。具体是1/10体积的buffer,酶的总体积控制在1/10以内,比如10微升
体系酶
量不要超过1微升,20微升体系不要超过2微升。DNA加入1~1.5微克即可。用水补足体积。
...要做Xbal和XhoI
双酶切
实验,想请问一下
buffer
建议中2XTango是什么意 ...
答:
登录到fermentas的网站上最上方,在tool部分有一个Doubledigest的工具,点击点击进去以后,把你要切的两个
酶
勾上,提交,就会给出相应的
buffer
的建议。We recommend:
Buffer
2X Tango™2-fold excess of XbaI XhoI Incubate at 37°C 而且还可以看到每一种酶在此buffer中的活性,由于XbaI在2XTango...
takara公司的EcoR1和Not1 50μl
双酶切
反应
体系
的配制?
答:
酶各加1.5 ul,底物加入在2ug,37℃,1*H
Buffer
+BSA,
酶切
12小时。
请教高手10*
buffer
,2*buffer,1*buffer是什么意思啊?
双酶切
时他们之间...
答:
10*的就是十倍浓度的 比如说你要配50ul
体系
那就加5ul的10*
buffer
其他同理
Kpnl和BamHI
双酶切
的共用
Buffer
是什么?Fermentas公司的酶!
答:
建议BamHI专用
buffer
,加1uL的BamHI,2uL的KpnI。
<涓婁竴椤
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