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蓝白斑筛选目的
Blue-whitescreening
蓝白斑筛选
答:
【答案】: 指利用携带半乳糖苷酶α段重组质粒转化对应缺陷型大肠杆菌,产生β-半乳糖苷酶可将无色化合物X-gal切割出深蓝色的物质,使菌落产生颜色变化,从而根据颜色变化鉴定和
筛选
重组子的方法。
蓝白斑筛选
答:
蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法:是根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等
。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS),它并不破坏读框,但可使少数...
蓝白斑筛选
挑蓝斑还是白斑
答:
蓝斑。蓝白斑筛选是一种根据菌落颜色筛选重组子的方法,
用于从细菌中筛选质粒,是通过在含有X-Gal-IPTG的LA培养基中,观察菌落颜色来筛选白色菌落中含有的重组子质粒
,同时丢弃含有野生型质粒的蓝色菌落,所以挑选蓝斑。
蓝白斑筛选
的简介
答:
蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法,是根据载体的遗传特征筛选重组子,如a-互补 、抗生素基因等
。蓝白斑筛选是在指示培养基上,重组质粒的菌落是白色的,非重组质粒的菌落是蓝色的,以颜色不同为依据直接筛选重组克隆的方法 。
蓝白斑筛选
问题!!
视频时间 00:48
蓝白斑筛选
的原理是什么?
答:
由α-互补而产生的LacZ+细菌在诱导剂IPTG(异丙基硫代半乳糖苷)的作用下,在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落。而当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地破坏α片段的编码,使得带有重组质粒的LacZ-细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选,称为
蓝白斑筛选
。
从大肠杆菌基因型理解
蓝白斑筛选
的原理
答:
蓝白斑
:</原生lac操纵子破坏并引入lacZΔM15的菌株(如DH5a、DH10B和EPI400),lacZα功能状态会影响是否产生蓝色斑点,这是一种有效的
筛选
策略。XL10-Gold菌株的情况类似于前两者,但筛选过程中通常依赖额外的抗性基因(如氯霉素)来区分lacZΔM15的缺失效果。随着基因编辑技术的进步,科学家可以直接针对...
简述α互补和
蓝白斑筛选
的原理
答:
在重组质粒中插入片段使α-肽失活,可在指示平板上通过颜色
筛选
鉴别。不带有插入片段的载体,表达有功能的β-半乳糖苷酶,所用的宿主菌在染色体或附加体上缺失掉lacZM15基因,导致内源α-肽失活。载体pGEMZ或其它含lacZ基因的α-肽互补细菌,具有β-半乳糖苷酶的ω片段,所得功能β-半乳糖苷酶(α...
比较
蓝白斑筛选
法与插入失活法筛选的优缺点
答:
插入失活法在含抗性培养基中培养后并不能直接得到所需的重组体。而是需要进行菌落平板的影印复制, 才能够将所需的重组体挑选出来。
蓝白斑筛选
可以直接通过颜色判断抗性培养基中的所需重组体,并且两种抗性可以在同一培养基中同时筛选,大大提高了效率。蓝白斑筛选的所需工程菌为β半乳糖苷酶缺陷型菌株。
蓝白斑筛选
的平板4°可以防止多长时间
答:
蓝白斑筛选
是重组子筛选的一种方法:是根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入 ...
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