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蓝白斑筛选
蓝白斑筛选
答:
蓝白斑筛选是一种基因工程常用的重组菌筛选方法
。野生型大肠杆菌产生的β-半乳糖苷酶可以将无色化合物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)切割成半乳糖和深蓝色的物质5-溴-4-靛蓝。有色物质可以使整个培养菌落产生颜色变化,而颜色变化是鉴定和筛选的最直观有效的方法。设计适用于蓝白斑筛选...
蓝白斑
选择中重组体和空载体的颜色分别是什么
答:
在该筛选方法中重组体和空载体的颜色分别是白色和蓝色。在
蓝白斑筛选
中,使用的培养基含有X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷),这是一种可以被β-半乳糖苷酶切割的底物,切割后会产生深蓝色的物质5-溴-4-靛蓝,使菌落呈现蓝色。对于空载体(即未插入外源DNA的质粒),当其在宿主细胞(...
蓝-白斑筛选
蓝白斑筛选
试验
答:
蓝-
白斑筛选
实验所需材料和步骤详解:试剂:X-gal: 2%母液(二甲基甲酰胺配置,存于-20℃的铝箔或黑纸包裹容器中),工作浓度为20ul/20ml平板。氨苄青霉素(Amp): 100mg/ml母液,存于-20℃冰箱,工作浓度100ug/ml。IPTG: 100mmol/L母液,同样存于-20℃,使用时取40ul/20ml平板。LB培养基: 1%蛋白...
蓝白斑筛选
实验,结果都是白斑说明所有的细胞都插入基因成功了吗?_百 ...
答:
蓝白斑筛选
不可能所有的都是白斑的,连接效率没有那么高 建议你再检查下自己的实验
蓝白斑筛选
挑蓝斑还是白斑
答:
蓝斑。
蓝白斑筛选是一种根据菌落颜色筛选重组子的方法
,用于从细菌中筛选质粒,是通过在含有X-Gal-IPTG的LA培养基中,观察菌落颜色来筛选白色菌落中含有的重组子质粒,同时丢弃含有野生型质粒的蓝色菌落,所以挑选蓝斑。
蓝白斑筛选
,怎样使蓝斑快速显色
答:
1、选择正确的斑点:在开始
蓝白斑筛选
之前,第一步就是选择正确的斑点,这些斑点会最大化图案细节,使其更加清晰。2、调整斑点大小:在确定斑点位置后,接下来就要调整斑点的大小,以使图案更加清楚可见。3、调整斑点强度:根据需要,可以调整斑点的强度,以突出图案中的重要信息。4、选择颜色模式:最后,...
蓝白斑筛选
答:
蓝白斑筛选
的机理 由α-互补产生的Lac+ 细菌较易识别,它在生色底物X-gal(5-溴-4氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)下存在下被IPTG(异丙基硫代-β-D-半乳糖苷)诱导形成蓝色菌落。当外源片段插入到载体的多克隆位点上后会导致读码框架改变, 表达蛋白失活, 产生的氨基酸片段失去α-互补能力, 因此在...
蓝白斑筛选
的原理是什么
答:
蓝白斑筛选
是重组子筛选的一种方法,是根据载体的遗传特征筛选重组子,主要为α-互补与抗生素基因。蓝白斑筛选在指示培养基上,未转化质粒的菌落因无抗生素抗性而不能生长,重组质粒的菌落是白色的,非重组质粒的菌落是蓝色的,以颜色不同为依据直接筛选重组克隆的方法。一些载体(如PUC系列质粒)带有β-半...
蓝白斑筛选
的原理是什么?
答:
由α-互补而产生的LacZ+细菌在诱导剂IPTG(异丙基硫代半乳糖苷)的作用下,在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落。而当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地破坏α片段的编码,使得带有重组质粒的LacZ-细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选,称为
蓝白斑筛选
。缺点 由于多种原因,一些白色菌落...
蓝白斑筛选
的原理是什么?
答:
由α-互补而产生的LacZ+细菌在诱导剂IPTG(异丙基硫代半乳糖苷)的作用下,在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落。而当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地破坏α片段的编码,使得带有重组质粒的LacZ-细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选,称为
蓝白斑筛选
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