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用同种限制酶切割目的基因和质粒
有人说有
用同种限制酶切割目的基因和质粒
,在一些方法中却要用两种限制...
答:
不矛盾。用A、B两种
酶切出目的基因
来,可以防止自环。然后再用A、B酶去切
质粒
,也可防自环,且得到与目的基因互补的黏性末端,才能连接目的基因。所以,既要用两种不同酶切,还要保证质粒和目的基因一样的两种酶。
生物《2008.高考海南卷,右图为某
种质粒
表达载体简图,……
答:
解析:在基因表达载体的构建过程中
用同种限制酶
来
切割目的基因和质粒
,使之产生相同的黏性末端,以利于DNA片段的连接。将切割后的目的基因和质粒,用DNA连接酶进行连接,它们之间随机连接,可有三种产物:目的基因—载体连接物、载体—载体连接物和目的基因—目的基因连接物。从图中可以看出,目的基因的插入...
基因工程
用同种限制酶
处理
质粒跟目的基因
,那它们两个碱基序列不就一样...
答:
同种
限制酶
处理
质粒跟目的基因
,只是切点附近(即限制酶的识别序列,一般6对碱基)的碱基序列相同,而目的基因两端虽然与质粒上切出部分两端的碱基序列相同,但它们中间部分的碱基序列不相同,所以整体看它们不相同
高二生物 基因工程
目的基因和质粒
是否要
用同
一
限制酶
进行
切割
?
答:
目的基因和质粒
要[同时]
用同
一
种限制
性核酸内切
酶切割
,不然就没法连了。但最好用不同的
限制酶切
两端(
切目的基因
是不是应该切两下么),防止载体自连或目的基因自连。啊啊,这道题。这题是这样的,你仔细看一下质粒,若用酶2切,那质粒两处酶切位点都要断,所以质粒只能用酶1切,保证其只有...
...基因工程中,处理
质粒跟目的基因
,得
用同种酶
,那它从质粒上剪出的基 ...
答:
不一样。 若
目的基因
来自甲,要将其转入乙体内,则用某种
限制酶
将甲的目的基因切下,
用同种酶切开质粒
,由于同种酶切开的切口相同,目的基因就整合进了这个质粒里,而质粒原本是没有这个目的基因的。
基因工程中
用限制酶切割质粒和目的基因
用一
种限制酶和
两种限制酶是否都...
答:
不可以,只能
用同
一
种限制酶
来
切割质粒和目的基因
。原因是,用同一种限制酶来切割,可以产生相同的黏性未端,如果用两种
限制酶切割
,产生的黏性未端一般不相同。
以质粒为运载体,
用同
一
种限制酶切割质粒
与
目的基因
,运载体
与质粒
连接方...
答:
3种,
质粒
-
目的基因
互联,目目自连,质质自连 ,因为他们接口一样,所以会发生
基因工程中,为什么
切质粒和切目的基因
要
用同种限制酶
?
答:
''
用同种限制酶
说明质粒里面也有和目的基因一样的基因''这样说是不正确的。限制酶识别的是碱基对序列的顺序而不是“
基因种类
”。用同样的限制酶处理
目的基因和质粒
是为了产生相同的粘性末端,以便可以将两者连接起来(原理是:碱基对互补配对)。
为什么
同种限制酶切割
形成的末端相同时
目的基因与质粒
会反向连接,为 ...
答:
限制酶
的识别位点大多是反向对称的,如果只用
用同种酶切
,所得片段的2端序列相同,在连接时,是随机连接,不仅会出现反向连接,而且会出现片段串联。在分子克隆实验中,我们会用两种酶分别
切目的基因和质粒
的上下游,这样就保证了目的片段和质粒片段在连接时的方向性,如上游都用EcoR I,下游都用BamH。...
用同种限制酶切质粒和
含有
目的基因
的DNA,用DNA连接酶连接后为什么不会出...
答:
如果是
同种
酶,结果有如下可能,载体空连,载体和载体互连,载体和
目的基因
相连。通常这种情况下,载体
酶切
后要用CIP进行末端去磷酸化处理,这样就不能发生载体空连,载体和载体互连的情况了。。实际操作时,其实仍有一定比例的载体空连,因为CIP处理并不能达到100%效率。如果有用,请采用。
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