用同种限制酶切质粒和含有目的基因的DNA，用DNA连接酶连接后为什么不会出现载体-目的基因连接物这种产物？

Question

额。。问错了。。再问一遍，就是他会产生三种连接产物，那其中的那种载体-载体连接物是什么啊？等于没切么？

Answer 1

如果是同种酶，结果有如下可能，载体空连，载体和载体互连，载体和目的基因相连。
通常这种情况下，载体酶切后要用CIP进行末端去磷酸化处理，这样就不能发生载体空连，载体和载体互连的情况了。。
实际操作时，其实仍有一定比例的载体空连，因为CIP处理并不能达到100%效率。
如果有用，请采用。

Answer 2

不是…一种是需要的产物，一种是切开以后又合上了，等于没切。还有一种是载体载体连接的，就是两个载体连在一起的特殊产物追问

那这种在培养基上也能生长，如何筛选？

追答

这种可以用与筛选未被切开的载体相同的方法筛选啊

本回答被提问者采纳

Answer 3

不是，质粒环被切割后，两个相同的质粒之间可以相互连接形成载体-载体连接物，毕竟他们的末端能够互补追问

那这种载体载体会不会被导入受体细胞啊