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用同种限制酶切割目的基因和质粒
种酶切目的基因
是防治自身环化,”而书上为什么又说
答:
用同
一
种限制酶
目的是让运载体的末端和目的基因的末端互补.所以为了防止环化,需要对运载体加以修饰改造,使运载体的两个末端也不相同并且都刚好
与目的基因
的末端互补.
同种限制酶切割
载体和
目的基因
片段可获得相同粘性末端
答:
A、限制性内切酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且切割形成特定的粘性末端,所以
用同种限制酶切割
运载体与目的基因可获得相同的黏性末端,这样便于
目的基因与
运载体连接形成重组DNA分子,A正确;B、目的基因在受体细胞中成功表达才表示基因工程操作成功,仅仅检测到受体细胞含有目的基因,并不代表该...
在
基因
工程中,为什么要
用同
一
种限制
性核酸内切
酶切割
答:
一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列,在基因工程中,只有
用同种限制酶切
出来的切口(两端)才是相同的,这样
目的 基因与
运载体 被
切割
出来的粘性末端的氢键才能互相配对并连在一起,然后才用DNA连接酶将他们连接。
限制酶
为什么不会
切割
移入的载体
质粒
?
答:
构建重组
质粒
时并不是只用
同种限制酶切割目的基因和
载体,虽然理论上本应如此,一般都
用同种
才会容易处理,但常见的也有将两种限制性内切酶,也就是不同的限制酶进行双酶切,最后也会产生互补的黏性末端。其实用同一种限制酶,也就是单酶切,去分别切割目的基因与运载体这种方法是最简单。如果用传统酶...
高中生物
质粒和
和外源
基因
dna自身环化啥意思啊?
答:
质粒
和外源
基因
连接前要
用同种限制酶切割
,这样变成了有相同粘性末端的链状,本来是想链壮质粒和链状外源基因连接的,但是此时一个质粒和另一个质粒也可以连接,一个外源基因可以和另一个外源基因连接,而且是两端都连接 变成了环状 所以叫自身环化。简单来说就是DNA在连接酶的作用下,自身的两头或中间...
基因
工程的基本操作程序的目标获取
答:
④扩增过程:目的基因DNA受热变性后解链为单链,引物与单链相应互补序列结合,在DNA聚合酶的作用下进行延伸,如此重复循环多次。⑤结果:每次循环后的目的基因的量增加一倍,即成指数形式扩增。 ⑴、用一定的限制酶切割
质粒
,使之出现一个黏性末端切口。⑵、
用同种限制酶切割目的基因
,产生相同的黏性末端...
基因工程中为什么用两种
酶切质粒
和带有
目的基因
的dna片段?用一
种酶切
...
答:
用两种酶是为了得到链状的
目的基因
,一般是不用一
种酶
的,比如一
种限制
性内切酶可以得到 ---TA 的末端,因为DNA是双链,那么目的DNA的两端就可以形成互补(这里由于版面的关系我就不表示出来了,你自己简单的画个示意图就明白),产生一个环状的DNA分子,就很难用于研究了。在具体实验中还有其他的一些...
基因
工程的基本操作程序
答:
2、载体构建 组成:目的基因、启动子、终止子、标记基因。功能:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代;2、使目的基因能够表达和发挥作用。步骤:⑴用一定的限制酶切割
质粒
,使之出现一个黏性末端切口。⑵
用同种限制酶切割目的基因
,产生相同的黏性末端。⑶将目的基因片段插入质粒切口,...
高考生物:2009年江苏高考第34题,有关于
限制酶切割
形成重组
质粒
答:
别考虑太复杂了。如果换用Bst l与BamH l
酶切
,相当于单酶切(因为这2个酶的酶切位点一样),这样 1)质粒被切开一个口(2个粘性末端)2)线性片段被切开成三段(自己试试画一下)只有中间那段具有粘性末端,才能
和质粒
重组。将1)和2)混在一起,粘性末端互相连接,只能形成一种重组质粒。
基因
表达载体的构建需要哪些工具
酶
答:
过程:首先要用一定的限制酶切割
质粒
,使质粒出现一个缺口,露出黏性末端。然后
用同
一
种限制酶切断目的基因
,使其产生相同的黏性末端(部分限制性内切酶可切割出平末端,拥有相同效果)。将切下的目的基因的片段插入质粒的切口处,首先碱基互补配对结合,两个黏性末端吻合在一起,碱基之间形成氢键,再加入...
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