sds聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量是什么?

Question

如题所述

Answer 1

如下：

SDS是一种阴离子表面活性剂能打断蛋白质的氢键和疏水键，并按一定的比例和蛋白质分子结合成复合物，使蛋白质带负电荷的量远远超过其本身原有的电荷，掩盖了各种蛋白分子间天然的电荷差异。

聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺 (简称Acr) 和交联剂N，N’—亚甲基双丙烯酰胺（简称Bis）在催化剂作用下，聚合交联而成的具有网状立体结构的凝胶，并以此为支持物进行电泳。 

聚丙烯酰胺凝胶电泳可根据不同蛋白质分子所带电荷的差异及分子大小的不同所产生的不同迁移率将蛋白质分离成若干条区带，如果分离纯化的样品中只含有同一种蛋白质，蛋白质样品电泳后，就应只分离出一条区带。

用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的分子量，为什么有时和凝胶层析法所得结果有所不同？

两种方法原理不同，有差异是正常的。如果差距较大，要仔细分析。一般凝胶层析是非变性的，SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳是变性的，二硫键也被还原，所以是亚基（肽链）分子量。

凝胶层析与分子形状有关，一般marker都是球状蛋白，所以测球状蛋白分子量较准。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳与分子形状无关。有些蛋白性质特殊，不适于用SDS-凝胶电泳法测定。比如结构特殊的，如胶原；带很多电荷的，如组蛋白；带有较大辅基的，如糖蛋白。