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rna跑胶条带模糊的原因
如题所述
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推荐答案 2023-06-12
1、样品制备不当:样品制备不当:样品制备是影响琼脂糖凝胶电泳结果的关键因素之一。
2、带电物质浓度过高:如果DNA、RNA或蛋白质的浓度过高,会导致它们在凝胶中聚集在一起形成模糊的条带。因此,在进行琼脂糖凝胶电泳时注意调整样品浓度。
3、凝胶制备不当:凝胶制备也是影响结果的重要因素之一。如果凝胶制备不当,如pH值、离子强度或聚合物浓度等参数没有正确控制,会导致凝胶结构不稳定或缺陷。
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PCR
跑胶
,目的
条带
很亮,但是边沿不清楚,前后有拖尾现象,请教各位是什 ...
答:
9制胶过程中胶孔没 制好
。10
EB没有冲洗干净
。11模板混有基因组DNA,或模板中混有蛋白。12非特异反映。引物设计的不好,非特异,这种情 况容易出现非特异扩增造成有非特异性扩增带或拖尾现象。13电泳液用久了不换,电泳胶脏了 。14扩增的条件不合适,一般退火温度低时容 易使引物在非特异位置结合...
...连marker得
条带
都很宽,以至于分不清条带了,是
怎么回事
?
答:
检查你的梳子,
很可能是没有洗干净导致点样孔内有杂质造成条带弥散。还有是你的胶融化的不充分,或者凝结不充分
。请保证煮沸两次以上。凝固时凝固半小时以上。
...在最下面约200bp处还有一团
模糊的条带
。为何?
答:
下面模糊的带是没有消化干净的RNA
。提取的时候多用乙醇洗涤一次,拖尾可能会减弱。如果换成吸附膜提取,条带会更sharp一点。
rna
变性
胶条带
为何弥散,且染色效果不好
答:
操作过程中可能有RNase 污染
,降解严重。。
提
RNA跑
电泳跑的非常慢,跑了半个多小时还没跑过4分之一,最后出来的
条带
...
答:
从而影响后续实验。RNase存在广泛,内源性的存在各种组织和细胞内部,外源性的污染提取过程中的各类试剂、枪头、离心管、电泳槽等。所以,
条带
弱应该是防止RNase污染不到位所致。至于半个多小时还没跑出4分之一,应该是电压不够的问题,或者是搭桥时留有空隙。
提取的总
RNA跑
完电泳
条带
总是很浅,是提的量少浓度低了还是
怎么回事
...
答:
可能是。可以测下浓度看看。
RNA
很容易降解,提取时严格操作过程。
RNA
提取测的值挺好的,为什么
跑胶
跑成这样
答:
你的
胶
图没有,是不是弥散的
条带
,有可能是被
RNA
酶消化了,导致拖带,注意使用的离心管,枪头进行灭菌,紫外照射等,尽量使用depc水,还有电泳的东西也注意用紫外或者是depc处理浸泡等,去除酶
怎么才能让电泳出来的DNA或
RNA
清晰呢?
答:
1.
RNA
:RNA提取过程中不发生降解的话,一般普通的琼脂糖电泳会得到3条清晰地
条带
,上面两条比较亮,且第一条是第二条亮度的2倍,第三条比较淡。如果样品稍有降解,也会看到3条带,但最后一条较量,前两条亮度相当或第二条比第一条稍亮。如果还想使图谱更漂亮,可以跑变性
胶
电泳。比如甲醛变性...
我提的质粒在0.8%的琼脂糖电泳中,跑完后
条带不清晰
,不知道是什么
原因
...
答:
如果你的Marker跑出来没有问题,从上图看应该是你的质粒DNA浓度太高,最好质粒上样总量在500ng左右,不要超过1000ng。目标
条带
浓度过高容易造成拖带。最后,质粒由于是环状,超螺旋DNA和线性DNA的电泳速度不一样,所以电泳前一定要做酶切,把环状质粒切成线状;最好在质粒上有两个酶切位点,这样酶切...
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