TCID50的具体步骤是什么啊？

Question

如题所述

Answer 1

病毒半数组织细胞感染量（TCID50）的测定：

2.1.1 病毒培养和收获 将病毒接种于长成单层的待感染的宿主细胞，接种量为液体培养基量的10%,37℃培养，待出现病变后，冻融，收获病毒。

2.1.2 病毒的滴定 用DMEM培养基将病毒作连续10倍稀释，即10—1、10—2……每个稀释度取100μL加入96孔细胞培养板中，随后加入经0.25%胰酶消化的感染的宿主细胞100μL（细胞含量以105/mL左右 为宜），每个稀释度作8个重复，并设空白细胞培养对照。置37℃ 5%CO2培养箱中。

2.1.3 TCID50计算 逐日观察细胞病变，并记录细胞病变孔数，直到对照细胞老化脱落为止。计算病毒的TCID50