跑完电泳后,先用20%乙醇固色15分钟左右后,用去离子水清洗胶体,加入染色G250,底部条带,瞬间从蓝色变成黄色,(貌似实验已经失败,不清楚原因)变色后,想最后博一下,继续染色一夜,后用5%乙酸脱色一天一夜,但颜色完全未脱去,请问是什么原因?染液配制还是前面操作有问题?
谢谢各位高手指点,本人是职场新人,第一次做这个实验,现在很纠结。。。
我刚刚发现,实习生在配浓缩胶的时候 没有用1.0M的Tris缓冲液 而错误的使用了1.5M的 是不是因为这个原因的,因为这样两种胶就没有PH的梯度差了 。
谢谢大家的回答。我重复了一遍实验,又查了一些资料,条带变黄是因为缓冲环境偏酸,染色未脱及没色带,是因为染液配制问题。
染色一个晚上是没有影响的,只要脱色时间长一点就可以了