SDS-PAGE电泳遇到的问题。

电泳速度比平常快很多,而且进入分离胶后出现弥散,跑出的条带是斜,条带越跑越宽
这是今天开始跑的情况,很是不正常

第1个回答  2011-07-10
3个方面,电泳仪、缓冲液、胶
电泳仪你可以换一台好的试一下,如果跑出来还这样,下一步,如果好了,那么要么你设置出了问题,电压电流什么的,要么仪器坏了。。
缓冲液注意PH 以及SDS的量,可以换一瓶试一下,比如别人配的...如果还是有问题下一步,如果好了,那么...呵呵,话说你可以blame天平~~
胶如果配稀了或者没凝好也可能是弥散的...换块胶吧....

最后说一下 条带越跑越宽是必然的,条带最后终归会有部分弥散,就看你需要跑多少大小的蛋白,一般120V恒压65min10%或8%的胶30KDa以上都不会太弥散,如果你确实需要分离小蛋白,请使用glycine-SDS-PAGE,protocol自己上ncbi搜~~望实验顺利~~本回答被提问者采纳
第2个回答  2011-07-11
有三方面原因:电泳仪、缓冲液、胶
1.电泳仪你可以换一台好的试一下,如果跑出来还这样,下一步,如果好了,那么要么你设置出了问题,电压电流什么的,要么仪器坏了。。
2.缓冲液注意PH 以及SDS的量,可以换一瓶试一下,比如别人配的...如果还是有问题下一步,如果好了,那么...呵呵,话说你可以blame天平~~
3.胶如果配稀了或者没凝好也可能是弥散的...换块胶吧....追问

前几天跑出来的,maker跑得很斜,越来越宽,指示剂不起作用

第3个回答  2011-07-15
试一下将开始电压设较低的值;
配好的分离胶,老化时间加长一些,避免不均匀。。
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