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SDS-PAGE电泳遇到的问题。
电泳速度比平常快很多,而且进入分离胶后出现弥散,跑出的条带是斜,条带越跑越宽
这是今天开始跑的情况,很是不正常
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其他回答
第1个回答 2011-07-10
3个方面,电泳仪、缓冲液、胶
电泳仪你可以换一台好的试一下,如果跑出来还这样,下一步,如果好了,那么要么你设置出了问题,电压电流什么的,要么仪器坏了。。
缓冲液注意PH 以及SDS的量,可以换一瓶试一下,比如别人配的...如果还是有问题下一步,如果好了,那么...呵呵,话说你可以blame天平~~
胶如果配稀了或者没凝好也可能是弥散的...换块胶吧....
最后说一下 条带越跑越宽是必然的,条带最后终归会有部分弥散,就看你需要跑多少大小的蛋白,一般120V恒压65min10%或8%的胶30KDa以上都不会太弥散,如果你确实需要分离小蛋白,请使用glycine-SDS-PAGE,protocol自己上ncbi搜~~望实验顺利~~本回答被提问者采纳
第2个回答 2011-07-11
有三方面原因:电泳仪、缓冲液、胶
1.电泳仪你可以换一台好的试一下,如果跑出来还这样,下一步,如果好了,那么要么你设置出了问题,电压电流什么的,要么仪器坏了。。
2.缓冲液注意PH 以及SDS的量,可以换一瓶试一下,比如别人配的...如果还是有问题下一步,如果好了,那么...呵呵,话说你可以blame天平~~
3.胶如果配稀了或者没凝好也可能是弥散的...换块胶吧....
追问
前几天跑出来的,maker跑得很斜,越来越宽,指示剂不起作用
第3个回答 2011-07-15
试一下将开始电压设较低的值;
配好的分离胶,老化时间加长一些,避免不均匀。。
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SDS-PAGE电泳遇到的问题
。
答:
电泳
仪你可以换一台好的试一下,如果跑出来还这样,下一步,如果好了,那么要么你设置出了
问题
,电压电流什么的,要么仪器坏了。。缓冲液注意PH 以及
SDS的
量,可以换一瓶试一下,比如别人配的...如果还是有问题下一步,如果好了,那么...呵呵,话说你可以blame天平~~胶如果配稀了或者没凝好也可...
sdspage电泳
胶一半跑不下去
答:
SDS-PAGE电泳胶一半跑不下去可能是以下原因:1. 样品没有处理好,需要重新处理
。2.
缓冲液不新鲜
,需要更换新的缓冲液。
3. 电压过高或过低
,需要调整电压。4. 电泳温度过高或过低,需要调整电泳温度。5. 电泳时间过长或过短,需要调整电泳时间。6.
凝胶配制时没有混合均匀或胶中有气泡
,需要重新配制...
SDS-PAGE
蛋白
电泳
条带跑的有点倾斜是什么
问题
??求专家解答
答:
胶不匀吧 或者电压太高
SDS-PAGE
蛋白质
电泳问题
答:
至于加样散,
原因就可能是胶质不均了
。对于结果应该影响不大。电泳时条带歪了,说明分离胶不匀,最前面的溴酚蓝如果不在一条线上,就是这个问题,对于最终结果有影响,建议重做。当然,在灌注浓缩胶前,你可能使用30%酒精封闭过,酒精除不干净,或者滤纸吸干酒精碰触了胶面,都会有影响,前者会让蛋白...
谁能总结以下
SDS-PAGE电泳
常见
问题
的分析
答:
在
SDS-PAGE
不连续
电泳
中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而CL离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子就介于二者之间...
sds-page
预制胶不好会造成什么结果
答:
分辨率降低,
电泳
时间延长。1、分辨率降低:预制胶的质量不佳,其凝胶的分辨率会受到影响,导致电泳过程中条带不清晰,难以进行后续的实验操作。2、电泳时间延长:预制胶的质量不好,其凝胶的孔径会受到影响,导致电泳时间延长,这不仅会浪费时间,还会影响实验结果。
sds-page电泳
出现
问题
答:
电泳的
那个
问题
是不是你点DNA液的时候没点好,要么就是通电的电压没调好 脱色没完全退色是正常的,看的清楚就可以了……补充:那就有可能你的DNA没提的很纯,电泳分离不开来……再做遍吧,我跑过兔子跟河蚌的……应该是这个问题
最近做WB,发现
SDS-PAGE
上样后开始
电泳
不久就看见LOADING BUFFER漏到...
答:
一、可能是玻璃板没有加紧 二、浓缩胶没有凝固好,灌胶
的问题
三、电压是否大了?我们常用浓缩胶80v,30min.灌胶的问题可能性比较大,祝实验顺利
关于
SDS-PAGE电泳
答:
1.一般来说,加样孔还是足够深的应该有(1cm),如果觉得比较浅可以多加一点浓缩胶,用来压制胶水平的水或乙醇一点点就可以了。2.如果只是两边的孔走样,中间的没
问题
的话,两边的孔加样后条带不直,很可能是
电泳
槽下面的气泡没有排尽,或者根本就没有注意下面有气泡,另外在电泳过程中因为会产生热...
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