细胞内dna,rna的原位显示细胞化学法的运用有哪些？

Question

如题所述

Answer 1

细胞中的两种核酸D N A和R N A分子中都含有磷酸基团，都能亲合碱性染料。因此，一般的染料难以分辨它们。但是，用钾基绿-派罗宁混合染料染色时，甲基绿能将D N A染成绿色，而派罗宁将RNA染成红色。这种染色性能上的差异被认为是两种核酸聚合程度不同所致，其中D N A的聚合程度较R NA的聚合程度高，高聚合度的D N A选择高电荷密度的甲基绿，低聚合的RN A选择低电荷密度的派罗宁。
1 .器具：普通光学显微镜、水浴锅、染色缸、载玻片、盖玻片、载玻片钳、擦镜纸、滤低。
2.药品:甲基绿、派罗宁、石炭酸、丙酮、无水乙醇、95%乙醇、二甲苯、5%三氯醋酸、醋酸钠、冰醋酸、0.1%R N a s e。
(1)甲基绿一派罗宁染色液的配制，称取石炭酸0.25g、甲基绿0.3g、派罗宁0.7g，将石炭酸溶于100m l蒸馏水配置成炭酸水溶液。取此液30m l溶解甲基绿成甲液，另70m l溶解派罗宁乙液，甲乙两液混合成染色液。
(2)5%三氯醋酸的配制，三氯醋酸5g加蒸馏水100m l
(3)0.1%R N a s e的配制，称取R N A a s e0.01g溶于10m l 0.2M的醋酸缓冲液(p H=5.0)中，用时配置。
3. 材料:洋葱。-