第1个回答 2015-04-28
细胞化学染色是细胞学和化学相结合而形成的一门学科，它以细胞形念学为基础，结合运用化学反应的原理对血细胞内的各种化学物质做定性定位和半定量分析的方法.
一）固定
固定有物理法与化学法，物理法为干燥和火焰固定，化学法最常用的是甲醛、乙醇、丙酮和醋酸等。
（二）显示
1、偶氮偶联法：利用人工合成的酶底物，在酶作用下，产生分解产物，再与重氮盐结合引起偶氮偶联，使其形成不溶性的偶氮色素，以此证明酶的存在。
2、联苯胺法：粒细胞和单核细胞中的过氧化物酶作用于过氧化氢，释放新生态氧，使无色的联苯胺形成蓝色沉淀。
3、普鲁士蓝法：细胞内、外铁与酸性亚铁氰化钾作用，形成蓝色亚铁氰化铁沉淀。
细胞化学染色图册
4、雪夫反应：过碘酸氧化细胞内糖类中乙二醇基形成乙醛基，醛基与雪夫试剂作用，使无色品红形成红色沉淀。
5、金属沉着法：其他尚有物理学方法，如脂溶性染料染色（显示脂质）、荧光显示、放射自显影以及体外活体染色亦常用于临床血液细胞学诊断。
（三）细胞化学定量
粗略估量，以染色反的强弱，受色的深浅，人为地区别为阴性和各种程度的阳性。
百分法，只能反映细胞阳性率，不能反映受色强弱。
积分法，是常用的半定量法，将等级估量与百分率相结合它既反映了细胞阳性率的高低，又反映了细胞受色的强弱。
细胞化学染色 -
过氧化物酶染色
（一）四甲基联苯胺法生物
原理
粒细胞和单核细胞的胞浆内的髓过氧化物酶（POXorMPO）分解过氧化氢，释放新生态氧，使无色联苯胺氧化成蓝色联苯胺，后者进一步变成棕色化合物沉着于细胞质内。
试剂
1%TMB、亚硝基铁氰化钠饱和溶液、1%过氧化氢溶液、稀过氧w化氢溶液、瑞氏染色液
操作
1、取0.1%TMB乙醇溶液lml，加亚硝基铁氰化钠饱和溶液10ml，溶液呈淡棕黄色。
2、在新鲜干燥的血片上，加混合溶液0.5ml,放置lmin后，再加稀过氧化氢溶液0.7ml，染色6min。
3.瑞氏染液复染15～20min。
4.油镜镜检。
结果
细胞质内有蓝黑色颗粒者为阳性。
（－）无颗粒沉着；
（±）颗粒细小，分布稀疏；
（+）颗粒较粗，局灶分布；
（++）颗粒粗大，分布较密，占胞质1/2~2/3；
（+++）颗粒粗大，呈团块分布；
（++++）全部胞质均部满颗粒，可覆胞核。
临床意义
POX主要分布在粒细胞和单核细胞内，随着粒细胞成熟的程度而逐渐增强，中性分叶核粒细胞为强阳性。嗜酸性粒细胞阳性程度最强，其阳性颗粒比中性粒细胞粗大，有折光。碱性粒细胞为阴性。
（2）单核细胞：
原始单核细胞为阴性反应，幼稚单核细胞和成熟单核细胞呈弱阳性反应，颗粒细小，弥散分布。
（3）其他细胞
淋巴细胞、浆细胞、幼红细胞、组织细胞、巨核细胞均呈阴性反应。
（4）血小板过氧化物酶
主要定位于幼稚型巨核细胞的核膜上，可作为原巨核细胞的一种标志物，有助于FABM7的识别。
（5）过氧化物酶染色
主要用于鉴别急性白血病类型，急性髓细胞白血病多呈阳性反，以M3和M2型反应最强，MI和M5型反较弱，S故有助于区别M3和M5型。S急性淋巴细胞白血病呈POX阴性反，故为急性髓细胞和淋巴细胞白血病鉴别的重要指标。