求一条食品分析题目的答案

准确称取某样品1.1242g, 采用如下步骤测定其蛋白质含量:

样品置于凯氏烧瓶中→加催化剂及浓硫酸→在通风橱内置电炉上加热消化至溶液澄清透明呈蓝绿色→继续加热0.5h,冷至室温→加蒸馏水,再冷却→加几粒玻璃珠,倒入适量NaOH,→安装好蒸馏装置→冷凝管下端浸入接受瓶液面下,开始蒸馏→蒸馏结束用浓度为0.1098mol/L的标准盐酸滴定,用去20.30mL,空白消化液消耗0.30 mL。
请回答以下问题:

(1)这种测定蛋白质的方法是什么?简述其原理。

(2)加入的催化剂有哪些成分?各有什么作用?

(3)接受瓶中的液体是什么,为什么冷凝管下端要浸入液面以下?

(4)蒸馏结束要注意什么?

(5)计算该样品的蛋白质含量。

(1)测定蛋白质方法:常量凯氏定氮法

原理:蛋白质是含氮的有机化合物,蛋白质与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液 滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,蛋白质含量。含氮量×6.25=蛋白含量

(2)加入的催化剂如下:

加入硫酸钾: 提高溶液的沸点而加快有机物分解。但硫酸钾加入量不能太大,否则消化体系温度过高,会引起铵盐分解为氨气!

加入硫酸铜:起催化剂的作用,加速蛋白质的分解,缩短消化时间。还可指示消化终点的到达,以及下一步蒸馏时作为碱性反应的指示剂。

(3)接受瓶中的液体是:硼酸溶液、2~3滴混合指示剂

冷凝管下端进入液面以下的原因:氮是也氨气的形式蒸馏出来的,如果不在页面以下,就不能完全被吸收液吸收,造成结果偏小

(4)蒸馏结束要注意:氨全部蒸出,将冷凝管下端提离液面,用蒸馏水冲洗管口,继续蒸馏1分钟,用表面皿接几滴馏出液,以奈氏试剂检查,如无红棕色物生成,表示蒸馏完毕,即可停止加热。

(5)计算该样品的蛋白质含量,公式如下:

常量凯氏定氮法计算公式

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