双标水法实验方法

Question

如题所述

Answer 1

双标水的实验方法主要涉及国际上生产重氧水 (H218O)的厂家，如美国的Cambridge Isotope Laboratories, Inc (CIL)和Sigma Aldrich Corporation，其中CIL是全球领先的医用18O同位素分离企业。它们提供的重氧水规格有10.0 at%、95-10 at%和97.0 at%。国内的生产厂商如上海化工研究院和江苏华益埃索托普公司，前者采用“水精馏路线”生产10.0 at%、95.0 at%和97.0 at%的重氧水，后者则利用高效精馏技术，提供2%到97%的定制规格，年产量可达100 kg。双标水通常通过口服给予，需按比例配制并消毒，剂量根据年龄不同，婴儿至成人的范围是2H (0.05~0.70) g/kg T BW 和18O (0.12~0.40) g/kg T BW。浓度比例可根据同位素测试仪器的精度调整，剂量大可能费用增加，精度要求较高。

实验周期取决于同位素的生物半衰期，一般在1~3周之间。收集样品可以是尿液、唾液或血液，多点法和两点法是常用的收集方式。样品需储存在-20℃冰箱备用。分析过程包括预处理，使用气体同位素比质谱仪测定δ18O和δ2H。例如，罗伟等人在国内首次采用双标水示踪法测定正常成年人的能量消耗，尿样测定的精度高。分析结果的计算涉及δ值修正、同位素消除曲线的绘制，通过这些数据计算出CO2产生速率、呼吸商（RQ）和总能量消耗（TEE）等。其中，RQ会根据食物成分变化，而TEE的计算则采用Weir公式，包括rO2（氧气消耗速率）和rCO2（CO2生成速率）。