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大肠杆菌电转感受态
cacl2法制作
大肠杆菌感受态
细胞全过程可以超净外操作吗?
答:
完全可以的,但是操作需要注意污染。因为后面您还有筛选的步骤嘛。反正我做的是
电转化
,
感受态
制备要求不是想像中那么高的!
大肠杆菌感受态
细胞的制备及质粒的转化结果怎么分析?
答:
CaCl2法制备
感受态
的原理感受态细胞的制备质粒的转化 转化子的筛选 材料及方法 菌种:
大肠杆菌
BL21菌株 质粒:pGEX-6P-1感受态制备方法:CaCl2法 转化方法:热激法 CaCl2制备感受态的原理。细菌处于0·C,CaCl2的低渗溶液中,菌细胞膨胀成球形,转化混合物中的DNA形成抗DNase的羟基-钙磷酸复合物粘附于...
质粒导入
大肠杆菌
要用什么处理该菌,以使其处于什么细胞状态,从而吸收D...
答:
将
大肠杆菌
用氯化钙处理,以增大大肠杆菌细胞壁的通透性,使含有目的基因的重组质粒能够进入受体细胞,此时的细胞处于
感受态
(理化方法诱导细胞,使其处于最适摄取和容纳外来DNA的生理状态)。
求助
大肠杆菌感受态
细胞问题
答:
(1)质粒DNA的质量和浓度: 用于转化的质粒DNA应主要是超螺旋态的,转化率与外源DNA的浓度在一定范围内成正比,但当加入的外源DNA的量过多或体积过大时,则会使转化率下降。一般地,DNA溶液的体积不应超过
感受态
细胞体积的5%,1ng的cccDNA即可使50ul的感受态细胞达到饱和。对于以质粒为载体的重组分子...
大肠杆菌感受态
细胞转化实验正负对照
答:
转化 A.将-70 0C下保存的
感受态
细胞(200μl),室温下解冻后放置于冰上。B.将ND-PUCm-T质粒DNA溶液(不超过50ng)或PCR产物与pUCm-T质粒的连结产物,体积不超过10μl,轻轻摇匀,冰上放置30min。C.42 0C水浴中热击90s或370C水浴中热击5min,热击后迅速置于冰上冷却3-5min。D.向管中加入...
大肠杆菌感受态
细胞制备为什么要加入甘油
答:
加甘油的
大肠杆菌感受态
一般是用来
电转
的吧,加甘油是为了保护大肠杆菌。
常用
感受态
细胞制备方法有哪些?
答:
方法一:细菌转化的方法多以Mendel和Higa(1970)的发现为基础,其基本方法是用冰预冷的CaCl2或多种2价阳离子等处理细菌,使之进入感受态得以转化。用CaCl2制备新鲜或冷冻的
大肠杆菌感受态
细胞,常用于成批制备感受态细菌。本法适用于大多数大肠杆菌菌株,且迅速、重复性好。操作过程简述如下。1.从37℃...
感受态
细胞的制备
答:
大肠杆菌
的
感受态
细胞制备原理是取对数生长期的细菌处于0℃,CaCl2的低渗溶液中,菌细胞膨胀成球形,转化混合物中的DNA形成抗DNase的羟基-钙磷酸复合物粘附于细胞表面,经42℃短时间热冲击处理,促使细胞吸收DNA复合物,在丰富培养基上生长数小时后,球状细胞复原并分裂增值。被转化的细菌中,重组子中基因...
为什么
大肠杆菌感受态
细胞制备和转化
答:
转化实验用液态的LB是为了让细胞恢复培养,也有人称之为让其孵育,质粒或其他经在液态LB中恢复培养后再涂布平板(固态培养基),是为了分散开,以培养单克隆。一般经37度倒置培养12-16h后,就可以看到有单个克隆长出,就可挑取了。
关于酵母质粒转化
大肠杆菌
答:
大肠杆菌
属于细菌,酵母菌为单细胞真菌,细菌的基本结构包括:细胞壁、细胞膜、细胞质、遗传物质;真菌的基本结构包括:细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核等.故真菌和细菌在细胞结构上的明显区别是有无成形的细胞核.酿酒酵母的
电转感受态
制备方法和电转化方法 (1)接种工业酒精酵母至30 mL液体YEPD培养基,...
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