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大肠杆菌电转感受态
用钙离子处理成为
感受态
细胞的转化方法
答:
原因:目的基因导入植物细胞时,由于没有经过钙离子处理没有变成
感受态
细胞,细胞的通透性小,目的基因难以进入细胞。感受态细胞主要原理:1、通过处理使细胞的通透性变大。2、使得细胞膜表面出现一些孔洞,便于外源基因或载体进入感受态细胞。3、由于细胞膜的流动性,这种孔洞会被细胞自身所修复。
DNA进入
大肠杆菌
时为什么控制热激时间
答:
大肠杆菌
为
感受态
,热激时间长细胞膜破碎。
感受态
细胞有何特点?如何保证它的质量?
答:
特点:处于最适摄取和容纳外来DNA的生理状态 CaCl2法:操作:1.将快速生长的
大肠杆菌
置于经低温(0℃)预处理的低渗氯化钙溶液中,便会造成细胞膨胀,细胞膜通透性发生变化,极易与外源DNA相粘附并在细胞表面形成复合物。2.此时,将该体系转移到42℃下做短暂的热刺激,外源DNA就可能被细胞吸收。进入细胞...
感受态
细胞的转化要注意些什么
答:
(应注意OD600值与细胞数之间的关系随菌株的不同而不同),大于30kb的重组质粒将很难进行转化:所用的CaCl2等试剂均需是最高纯度的。对TG1菌株。所有的试剂都要灭菌。对于以质粒为载体的重组分子而言: 用于转化的质粒DNA应主要是超螺旋态的,并经高压灭菌处理,1ng的cccDNA即可使50ul的
感受态
细胞达到...
商用
大肠杆菌
DH5a
感受态
细胞,是否含有质粒?或者有没有抗性?
答:
(1)从公司买来的
大肠杆菌
DH5a
感受态
细胞,本身含有质粒吗?理论上是不会含有的。(2)我把DH5a感受态细胞一小时液体震荡培养后,直接涂布含有kana的LB培养基上,作为对照。但是为什么有较多的单克隆长出来?什么转化都没有做。是它本身就对卡那有抗性吗?DH5a感受态细胞是没有卡纳抗性的,除非你的染了...
制备
大肠杆菌感受态
细胞时可以用枪吸打把菌液悬起来么
答:
最好不要。我曾经怕麻烦试过用枪头悬浮菌液,最后发现
感受态
的转化效率有比较大的降低。
在基因工程中钙离子能使
大肠杆菌
处于什么状态?
答:
在基因工程中,用钙离子处理
大肠杆菌
,可以使大肠杆菌处于容易吸收DNA片段的
感受态
。
...吗?扩增质粒后提取质粒的时候会不会把
大肠杆菌
自身的质粒也提取出...
答:
你好!dh5α
感受态
细胞是常用的细菌质粒扩增提取细菌,其本身是含有质粒的。普通的
大肠杆菌
细胞内有一种“免疫”机制,即当外源DNA 侵入时,会产生酶类将外源DNA切除,无法进行复制增殖。而其自身质粒的基因组被修饰(如甲基化)所以不被限制酶识别,不会被剪切。DH5α菌株是一种经诱变的菌株,其基本...
质粒DNA转化
大肠杆菌感受态
细胞再热激以后进行活化培养,这时培养基为 ...
答:
活化培养用的一般是SOC培养基,这种培养基比LB培养基营养,此时进行的活化培养只是为了让
大肠杆菌
迅速复苏,恢复分裂活性,此时的细胞还不具抗性,加入抗生素会细胞会死亡。
大肠杆菌感受态
和农杆菌感受态的选择
答:
除非你的实验目的一定要求你要用农杆菌,或者是最后一步要转基因了,否则,
大肠杆菌
更好,因为它的商业化各种都很齐全,想要什么就有什么。
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