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多少浓度的rna跑胶效果最好
RNA跑胶
多长时间才能把28S,18S和5S分开,我跑了大概30分钟,出来的是一条...
答:
...1% 琼脂糖凝胶,我跑个5分钟就能区分开了... 您哪条很亮的带是 基因组DNA污染吧...
rna
电泳电流应该为
多少
答:
目的是让
RNA
电泳的时间尽可能的短,以防降解,所以用大电流,跑5-10min,比如200V。DNA的凝胶电泳凝胶电泳是分子克隆的中心技术之一。1. 琼脂糖凝胶用于分离大于200~1000bp的片段;操作简单、快速,且分离范围广,分辨率高。2. 聚丙烯酰胺凝胶用于分离5-500bp的片段;
效果好
、分辨率极高,相差1bp的...
RNA
凝胶电泳注意事项
答:
RNA 标准参照有商业制品。DNA 标准参照在甲醛
胶
中跑得不太好,不应使用。体外RNA 合成的指定模板可以用来合成长度确定
的RNA
转录物,如果某未知RNA的长度必须要精确知道的时候可以采用。溴酚蓝和二甲苯腈蓝可以用来做指示染料。就像在DNA 电泳中一样,其确切的位置取决于琼脂糖的品质与
浓度
(见表1) 。
【求助】怎么选
RNA
Marker???【急】
答:
是根据转入的DNA片段大小吗?电泳结果中的18s,28s意义是什么?请各位高手指教,谢谢!!提取
RNA
后,跑电泳的目的是检测RNA是否降解。mRNA大小不等,在胶上成弥散片状,不好评价是否降解,故常用18S、28S的完整性来间接评价mRNA是否降解,18S、28S是rRNA, 在细胞中
比较
稳定, 而且含量高 且单一.要检测外源...
提取
rna
的照胶28s是什么意思
答:
如果你提取的是total
RNA
的话,有很大一部分是rRNA,真核的rRNA在
跑胶
的时候可以看到5s(和5.8s混在一起,质量好的时候能看见),18s,28s,三条带,用以判断
rna
的质量。
提取
的RNA
的三条带中哪个最亮
答:
其中28S
比较
亮,原核生物的话为23S和16S,其中23S较亮,5S条带相对于这两条带来说就很弱了。当然也有些特殊物种即没有28S、18S条带,也没有23S、16S条带,这就只有5S条带了,具体问题具体分析嘛。若果有条件可以用安捷伦2100生物分析仪检测,对比峰图和胶图就能够准确知道
RNA
是否降解了。
全基因组DNA
跑胶
拖尾
答:
后来就用2ul的,
效果
还不错。至于样品前面拖尾,我觉得不一定是RNA污染吧,即便是
有RNA
污染,也不会有你描述的这种拖尾吧,看是否有RNA的污染主要是看是否有28s 18S RNA的条带,造成拖尾的原因我觉得可能还是胶制得不太好,注意
跑胶
时所用的电压,还有制备胶用的缓冲液和电泳时的缓冲液要一致。
如何电泳估计DNA
浓度
答:
一般都是用nanodrop测定DNA和
RNA的浓度
,用量只需要1ul 没有严格要求的话一般不用测浓度,2号样取1ul做连接就可以了。一般用nanodrop测,1μl就可以了。如果没有,
跑胶
可以估测。可以
比较
条带与marker中分子量比较接近的条带的灰度,再根据marker的量计算出大致的浓度。做连接用不了多少DNA的。根据...
RNA跑
电泳用什么好?
答:
非变性RNA 电泳 非变性条件下
的RNA
凝胶电泳保留了RNA 分子的二级结构。琼脂糖通常优于丙烯酰胺,因为其毒性较低,并且在可分离典型RNA 分子的
浓度
下
更
易于处理。我们为非变性琼脂糖凝胶电泳提供了便捷试剂,包括方便的预制E-Gel™ 琼脂糖凝胶和用于您自制凝胶的UltraPure™ 试剂。非变性RNA ...
跑凝胶电泳指示剂加的太少影响吗
答:
可将凝胶 浸泡于1mmol/LMgSO4中1h或10mmol/L MgCl2中5min,使非结合的EB褪色,这 样可检查到10ng的DNA样品,EB也可用于检测单链DNA或
RNA
,但其对单链核酸的亲和力相对较小,荧光产率也相对较低. 在凝胶或电泳缓冲液中加入终
浓度
为0.5μg/ml的EB,染色可在电泳过程中进行,能随时观察核酸的迁移情况...
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