99问答网
所有问题
当前搜索:
简述蓝白斑筛选的原理及过程
蓝白斑筛选
答:
蓝白斑筛选的过程依赖于α-互补产生的Lac+细菌
。在含有生色底物X-gal和IPTG的培养基中,Lac+细菌会形成蓝色菌落,因为它们在IPTG诱导下产生蓝色的β-半乳糖苷。然而,如果外源片段插入载体的多克隆位点,会破坏编码区域,导致蛋白表达失常,丧失α-互补能力。在这种情况下,转化子在生色诱导培养基上形成...
简述蓝白斑筛选的原理
答:
蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法,是根据载体的遗传特征筛选重组子,主要为基因互补与抗生素基因
。蓝白斑筛选在指示培养基上,未转化质粒的菌落因无抗生素抗性而不能生长,重组质粒的菌落是白色的,非重组质粒的菌落是蓝色的,以颜色不同为依据直接筛选重组克隆的方法 。
有没有高人能告诉我
蓝白斑筛的
步骤,
原理
。谢谢。 有加分
答:
通俗易懂的说法就是LacZ'是左半边,失去正常氨基端(5'端)的B-半乳糖苷酶是右半边,组合在一块形成有功能的酶。(2)明白以上这点,我们再往下说。1.一般来说,做
蓝白斑
,质粒载体上有LacZ'2.Lac I,是LacZ'的抑制基因,表达的阻遏蛋白和LacZ'上的操作子区结合将会阻遏LacZ'基因的表达,当有...
蓝白斑筛选
问题!!
视频时间 00:48
蓝白斑筛选的
蓝白斑筛选
原理
答:
是重组子
筛选的
一种方法,一些载体带有β-半乳糖苷酶N端α片段的编码区,该编码区中含有多克隆位点,可用于构建重组子。这种载体适用于仅编码β-半乳糖苷酶C端ω片段的突变宿主细胞。因此,宿主和质粒编码的片段虽都没有半乳糖苷酶活性,但它们同时存在时。α片段与ω片段可通过α-互补形成具有酶活性...
蓝白斑筛选的原理
是什么?
答:
由α-互补而产生的LacZ+细菌在诱导剂IPTG(异丙基硫代半乳糖苷)的作用下,在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落。而当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地破坏α片段的编码,使得带有重组质粒的LacZ-细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选,称为
蓝白斑筛选
。
蓝白斑筛选
答:
蓝白斑筛选的机理
由α-互补产生的Lac+ 细菌较易识别,它在生色底物X-gal(5-溴-4氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)下存在下被IPTG(异丙基硫代-β-D-半乳糖苷)诱导形成蓝色菌落。当外源片段插入到载体的多克隆位点上后会导致读码框架改变, 表达蛋白失活, 产生的氨基酸片段失去α-互补能力, 因此在...
简述蓝白斑筛选的原理
。
答:
蓝白斑筛选的原理
分类:生物科学蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法: 是根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS)...
从大肠杆菌基因型理解
蓝白斑筛选的原理
答:
蓝白斑
:</原生lac操纵子破坏并引入lacZΔM15的菌株(如DH5a、DH10B和EPI400),lacZα功能状态会影响是否产生蓝色斑点,这是一种有效的筛选策略。XL10-Gold菌株的情况类似于前两者,但
筛选过程
中通常依赖额外的抗性基因(如氯霉素)来区分lacZΔM15的缺失效果。随着基因编辑技术的进步,科学家可以直接针对...
简述
α互补
和蓝白斑筛选的原理
答:
在重组质粒中插入片段使α-肽失活,可在指示平板上通过颜色
筛选
鉴别。不带有插入片段的载体,表达有功能的β-半乳糖苷酶,所用的宿主菌在染色体或附加体上缺失掉lacZM15基因,导致内源α-肽失活。载体pGEMZ或其它含lacZ基因的α-肽互补细菌,具有β-半乳糖苷酶的ω片段,所得功能β-半乳糖苷酶(α...
1
2
3
4
涓嬩竴椤
其他人还搜
蓝白斑筛选原理和步骤
细菌蓝白斑
蓝白斑实验的基本原理
杆状质粒蓝白斑最佳使用方法
蓝白斑筛选名词解释
lacz蓝白斑筛选原理
蓝白斑筛选目的
蓝白斑筛选培养基配方
蓝白斑筛选密密麻麻的