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基因克隆技术的步骤
基因克隆的
基本
步骤
有哪些
答:
基因克隆的基本步骤流程如下:
一、目的DNA片段的获得:DNA克隆的第一步是获得包含目的基因在内的一群DNA分子
,这些DNA分子或来自于目的生物基因组DNA或来自目的细胞mRNA逆转录合成的双链 cDNA分子。由于基因组DNA较大,不利于克隆,因此有必要将其处理成适合克隆的DNA小片段,常用的方法有机械切割和核酸限制...
基因克隆
主要分为以下几个
步骤
:①制备目的基因和相关载体;②___;③...
答:
【答案】:将目的
基因
和有关载体进行连接$将重组的DNA导入受体细胞$DNA重组体的筛选和鉴定$DNA重组体的扩增、表达和其他研究
什么叫基因克隆?简述以质粒为载体的
基因克隆的
基本
过程
答:
基因克隆即重组DNA技术,指在体外对DNA分子按照既定的目的和方案,
采用酶学方法将不同来源的DNA分子在体外剪切和重新连接,组装成一个新的DNA分子.在此基础上
,将这个DNA分子导入到一定的宿主细胞,使它能够在宿主细胞中扩增,形成大量的子代分子,此过程即称为基因克隆.基因克隆包括四个基本技术环节 ...
基因克隆
有哪些
步骤
,如何筛选阳性克隆
答:
简单的说一下:扩增目的基因,比如通过PCR的方法。PCR扩增的序列可以通过酶切或者TOPO TA的方法插入到载体质粒
。转染大肠杆菌 筛选阳性克隆一般常采用蓝白克隆方法,就是在载体上,序列的插入位置本来是一个完整编码β-gal这个酶的序列,如果不被破坏,产生的酶可以降解细菌培养盘上的底物,形成蓝色产物。...
如何
克隆
一个
基因
?具体说明
答:
回答:首先要取得目的基因:可用mRNA转录或用限制酶切割DNA! 用PCR
技术
进行扩增:就是♀冰紫幽精♂所说的! 这样就能
克隆基因
!
简述利用DNA重组
技术
在大肠杆菌细胞中
克隆
外源
基因的
基本
过程
?
答:
利用DNA重组
技术
在大肠杆菌细胞中
克隆
外源
基因的
基本
过程
通常包括以下
步骤
:DNA提取:从源生物体中提取所需的外源DNA片段,可以通过PCR扩增、酶切等方法获取特定的DNA序列。载体准备:选择适当的载体,常用的是质粒(plasmid)。质粒是环状的DNA分子,可以在细菌细胞中自主复制。将质粒进行线性化处理,通常通过...
狗狗
基因克隆
是个什么
过程
?需要提供啥
答:
克隆犬
的过程
首先面临的是成熟卵母细胞的获取问题。
克隆技术
涉及三个主要技术环节:首先是成熟卵母细胞的获取和卵母细胞去核;其次是克隆胚胎的制备;最后是克隆胚胎的移植。获取成熟卵母细胞主要有两种方法:一是体外成熟培养,二是体内成熟获取。例如,对于猪、牛、羊等动物,可以在屠宰场从被屠宰动物的...
基因克隆的
具体操作
步骤
是什么?
答:
用引物PCR扩增目的
基因
片段;选择合适(抗性标记、酶切位点等)的
克隆
载体(为了保真扩增),并将PCR片段连接入克隆载体中;(一般用Taq酶的PCR产物在末尾会自带一个A,可在Solution 1作用下与两端各带一个T的线性T载体直接相连)将连接产物转化入感受态大肠杆菌,使之在含有抗生素的培养基上生长扩增;从...
整个
基因克隆的过程
包括哪些步骤
答:
基因克隆
是70年代发展起来的一项具有革命性的研究
技术
,可概括为∶分、切、连、转、选。最终目的在于通过相应技术手段,将目的基因导入寄主细胞,在宿主细胞内目的基因被大量的复制。
怎样克隆基因或是
克隆基因的
一般
步骤
是什么?
答:
一般情况下有两种方法:一、反转录法:用已知的单链mRNA反转录出一条单链的DNA,再用碱基互补配对原则合成双链DNA。二、用已知的蛋白质的多肽链推测出单链mRNA(一个氨基酸对应相应的密码子)上碱基的排列顺序,再根据单链mRNA上碱基的排列顺序推测出一条单链DNA上碱基的排列顺序,再推测出双链DNA上...
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