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目的基因的克隆步骤
基因克隆的
基本
步骤
有哪些
答:
基因克隆的基本步骤流程如下:
一、目的DNA片段的获得:DNA克隆的第一步是获得包含目的基因在内的一群DNA分子
,这些DNA分子或来自于目的生物基因组DNA或来自目的细胞mRNA逆转录合成的双链 cDNA分子。由于基因组DNA较大,不利于克隆,因此有必要将其处理成适合克隆的DNA小片段,常用的方法有机械切割和核酸限制...
从生物体
克隆目的基因的
方法有哪些?
答:
实行功能克隆的关键步骤是分离出高纯度蛋白质
。对于产物不明的基因,不能利用这一方法进行克隆。3.定位(图位)克隆法 定位(图位)克隆法(positionalcloning)根据目的基因在染色体上的位置,进而通过染色体步移(chromosomewalking)进行克隆。需预先建立具有目的基因的适宜遗传分离群体(近等基因系或分离群...
怎样
克隆
一个
目的基因
?
答:
其主要步骤包括:(1)将目标基因定位在高密度的分子标记连锁群上
;(2)利用PFGE将连销标记的遗传图谱距转换成物理距离;(3)构建YAC文库,找到含连锁标记的YAC克隆,并通过克隆的排序获得目标基因的DNA片段;(4)通过转化和功能互补试验证实基因所在的DNA片段。如用该技术已分离出番茄抗根结线虫mi基因...
何谓基因克隆?简述
基因克隆的
基本
过程
。
答:
基因克隆的基本过程包括:①目的基因的获取
;②克隆载体的选择与构建;③目的基因与载体的连接;④重组DNA分子导入受体细胞;⑤重组体的筛选。
转
基因过程
分为哪几部分
答:
在一个典型的转基因植物生产过程中,
这些步骤分别称为目的基因克隆、载体构建、转化、重组,以及筛选
。一、基因克隆必须得有这个需要被转的基因。现在最广泛使用的BT蛋白基因和抗草甘膦基因,就来自于两种细菌。因此,细菌来源的基因,也可以在植物中起作用。通过序列比对和分析,并加上如今丰富的基因组...
目的基因克隆
的基本原理
答:
基因克隆
是一种通过人工手段将一个特定的基因复制并插入到另一个生物体的基因组中的技术,被广泛应用于基因工程和生物医学研究领域。其基本原理包括:1. 提取目标基因:首先从目标生物体中提取需要
克隆的基因
,通常采用PCR或限制性酶切等方法来从基因组DNA中放大或切割出目标基因。2. 将目标基因克隆到...
植物转
基因
技术有那些
步骤
和流程?
答:
利用聚合酶链反应(PCR)技术,能够从原生物的基因组中精确地
克隆
出所需的基因片段。2. 载体构建:接下来,将目的基因通过特定的酶连接到质粒分子上,形成一个含有
目的基因的
新质粒分子。3. 转化:在这一
步骤
中,通常使用农杆菌作为载体将基因转移到植物细胞中。农杆菌能够侵染植物细胞,并促进细胞分裂,...
体外
克隆目的基因的
方法
答:
相邻片段的体外
克隆目的基因
法:(1)PanhandlePCR法:在限制酶消化的DNA3’端加一个与未知序列上游已知序列互补的单链引物,从而使经变性后产生的单链DNA分子内聚合,导致己知DNA定位于未知相邻DNA侧翼区段。引物设计是该技术运用的关键所在,所需引物包含-一个与已知序列上游互补的单链引物和两对位于该...
基因克隆
主要分为以下几个
步骤
:①制备
目的基因
和相关载体;②___;③...
答:
【答案】:将
目的基因
和有关载体进行连接$将重组的DNA导入受体细胞$DNA重组体的筛选和鉴定$DNA重组体的扩增、表达和其他研究
获得植物转
基因
植物需要哪些
步骤
答:
在一个典型的转基因植物生产过程中,
这些步骤分别称为目的基因克隆、载体构建、转化、重组,以及筛选
。一、基因克隆必须得有这个需要被转的基因。现在最广泛使用的BT蛋白基因和抗草甘膦基因,就来自于两种细菌。因此,细菌来源的基因,也可以在植物中起作用。通过序列比对和分析,并加上如今丰富的基因组...
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