基因克隆的几种常用方法

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第1个回答 2018-06-19

基因工程的上游工程主要是目的基因的制取和无性繁殖。具体地说是从生物体的组织、器官或细胞制取目的基因或者人工合成目的基因，将目的基因与载体的DNA拼接，使重组体分子导入受体细胞，筛选和进行无性繁殖。这个过程可以称为基因克隆(gene cloning)。本回答被网友采纳

第2个回答 2018-06-19

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基因克隆的方法有哪些答：PCR扩增法。这是一种常见的基因克隆方法，其基本原理是利用特定的引物与模板DNA序列结合，通过DNA聚合酶的作用进行DNA复制。整个过程包括变性和退火两个主要步骤，其中变性是指使DNA解旋成为单链，退火则是引物与模板结合并进行复制。通过不断循环这两个步骤，可以得到大量的目的基因片段。这种方法操作简便，...

怎样克隆一个目的基因?答：目的基因的克隆是利用一个单一的基因副本的行为。有pcr方法,凝胶电泳方法,色谱法,琼脂糖凝胶电泳法,质粒法等。具体方法可分别检索文献。常用的植物目的基因克隆技术1、通过已知基因产物的分析和鉴定 这类技术主要通过生物化学和病理学研究分离鉴定有关基因的蛋白产物,并对蛋白质氨基酸顺序进行分析,推断出编码该蛋白质...

基因克隆的基本步骤有哪些答：由于基因组DNA较大，不利于克隆，因此有必要将其处理成适合克隆的DNA小片段，常用的方法有机械切割和核酸限制性内切酶消化。若是基因序列已知而且比较小就可用人工化学直接合成。如果基因的两端部分序列已知，根据已知序列设计引物，从基因组DNA 或cDNA中通过PCR技术可以获得目的基因。二、载体的选择：基因克隆...

已知一个物种的基因组,怎么克隆目的基因答：1.原位杂交法：这一种利用特异探针的直接选择法，是一种十分灵敏而且快速的方法，用于杂交的探针可以是双链DNA，也可以是单链DNA，或是RNA。杂交的检测常用放射性同位素标记探针，通过自显影来进行。显然，有效进行杂交筛选的关键是获得特异的探针。探针的获得有如下方法：①如果目的基因序列是已知的，或...

基因克隆答：下面我们以lncRNA PVT1的克隆和表达,分别采用T/A克隆,传统酶切-酶连克隆和无缝克隆进行示例。(1) T/A克隆 T/A克隆是把PCR片段与一个具有3’-T突出的载体DNA连接起来的方法(图15)。使用该方法进行基因克隆时不需要考虑酶切位点问题,但需要选择Taq DNA聚合酶进行PCR扩增,其产物的3’端才会多一个突出的A;...

基因克隆的策略有哪些答：利用计算机来协助克隆的第一步是必须获得感兴趣的EST，在dbEST数据库中找出EST的最有途径是寻找同源序列，标准：长度≥100bp，同源性50%以上、85%以下。可通过数个万维网界而使用BLAST检索程度实现，其中最常用的如NCBI（National Center for Biotechnology Information）的GenBank、意大利Tigem的ESTmachine（...

克隆真核基因常用的方法答：克隆真核基因常用的方法有逆转录法和和学合成法

如何利用基因克隆的方法将一个耐盐基因导入水稻中?答：1、首先，需要从耐盐植物中克隆出目标基因。可以通过PCR扩增、cDNA文库筛选等方法，从植物组织中提取目标基因的DNA序列。2、将目标基因插入适当的载体中。在选择载体时，需要考虑到宿主细胞的生长特性和稳定性，以及基因转移的效率和稳定性。常用的载体包括质粒、病毒等。3、将载有目标基因的载体转化至适宜...

基因如何克隆???答：载体的形式常会因为基因克隆的目标生物体种类不同而有些许的不同。动物为基因克隆的目标生物体时，则常用的载体是动物病毒（例如：反转录病毒）；植物则常用一种可以诱发植物发生肿瘤的细菌性质体（Ti质体）当成基因克隆的载体。，有人将干扰素（interferon）的基因与大肠杆菌的质体相连后放入大肠杆菌中，让...

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