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电泳法筛选重组子的原理
如题所述
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推荐答案 2023-03-02
电泳法筛选重组子的原理是利用电泳技术将基因重组片段从其他DNA片段中分离出来。根据查询相关公开信息显示,电泳过程中,每个DNA片段在电压作用下在电泳胶中移动,并根据其尺寸大小,分别向正电压方向或负电压方向移动,从而实现对DNA片段的精确分离。
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简述凝胶
电泳的原理
与
方法
答:
凝胶电泳(Gel electrophoresis)是指DNA分子提取得到以后,需要通过
电泳技术
来检测其数量和质量。琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶电泳是基因操作的核心技术之一,它能够用于分离、鉴定和纯化DNA片段。 该技术操作简单而迅速,已经成为许多通用的分子生物学研究方法,如DNA
重组
、DNA核苷酸序列分析等。当一种分子被放置在电...
DNA的纯化与分离
答:
凝胶
电泳
是分离不同长度DNA分子的标准
方法
。电泳常用的凝胶有两种: 琼脂糖(agarose)凝胶和聚丙烯酰胺(polyacrylamide)凝胶 。如果要对各小片段做克隆,利用质粒载体并需转化(transformation)回寄主,当要 回收
重组子
时,必需去除杂质。此时,影响回收的主要干扰是寄主染色体DNA。为了得到重组子DNA,一种...
琼脂糖凝胶
电泳
如何判别是阳性克隆?
答:
1、琼脂糖凝胶
电泳
判别是阳性克隆琼脂糖凝胶电泳判别是阳性克隆根据
重组子
遗传重组表型改变的
筛选法
:利用抗生素抗性基因进行筛选,利用报告基因筛选克隆子,据重组子结构特征的筛选法,琼脂糖凝胶电泳比较重组DNA的大小。2、限制性内切酶分析。印迹杂交
方法
。PCR法。
DNA
重组
体的
筛选
和鉴定的常用
方法
有哪几种?
答:
②核酸内切酶酶切图谱分析:利用核酸内切酶切割重组体,然后电泳检测进一步确定重组体是否含有目的基因
。③分子杂交法:可把待选菌在平板上培养成菌落,用硝酸纤维素膜盖在平板上,菌落DNA就会转移到滤膜上,然后用放射性同位素(32P)标记的目的基因片段作为探针进行检测,就可把正确的重组菌落探测出来。
琼脂糖凝胶
电泳的
适用范围
答:
DNA在碱性条件下(pH8.0的缓冲液)带负电荷,在电场中通过凝胶介质向正极移动,不同DNA分子片段由于分子和构型不同,在电场中的泳动速率液不同。溴化乙锭(EB)可嵌入DNA分子碱基对间形成荧光络合物,经紫外线照射后,可分出不同的区带,达到分离、鉴定分子量,
筛选重组子的
目的。(按0.3-1.5%的...
谁知知道 sds的
电泳原理
啊
答:
的支持物,因此,在电泳过程中除了注意
电泳的
基本
原理
以外,还必须注意与凝胶本 身有关的各种性质(网孔的大小和形状等)。可通过下式计算来选择适当的凝胶网 孔。公 式 式中:P为网孔平均直径,C为多聚体浓度,d为该多聚体分子直径(若不是卷曲的分 子应为5A),K为常数,K值取决于涨胶的几何...
转化子(transformant )的
筛选
与
重组子的
鉴定
答:
2. 基于目的基因序列的筛选与鉴定(核酸水平筛选): PCR鉴定法、酶切法、测序法 从转化后的菌体克隆中分离质粒,
电泳
,比较其分子大小。 3. 基于目的基因表达产物的筛选与鉴定(蛋白质水平
筛选法
): 检测酶活性、分子大小 4. 基于报告基因的筛选与鉴定 ...
emsa实验
原理是什么
?
答:
EMSA实验
的原理
是基于DNA结合蛋白与DNA的特异性结合,依据实验需要,设计标记探针、非标记探针、蛋白特异性抗体等参照物。通过
电泳
迁移率的变化来进行定性和定量分析,钟鼎生物提供的EMSA实验(凝胶/电泳迁移率实验)基于生物素标记探针与对应的DNA结合蛋白的特异性结合,设计合理、科学的实验方案,为客户提供...
酶切
电泳法
鉴定
重组子有什么
不足的地方
答:
1、可能发生切完之后,连接时自己又重新连上的现象。2、插入片段没有方向性,插入片段的编稿桐码链是atcgatg,可以以这个顺序,也可纯搜以反过来连接进去。
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