SDS电泳问题 急急急 在线等~

Question

SDS电泳时忘记离心了 会有什么后果？
另外 加样量太多会造成什么影响？
我的电泳图的蛋白质量算出来只有60KDa左右，但实际应该是77KDa 是怎么回事？是因为加样量多的缘故吗？

Answer 1

离心是为了除去杂质，否则跑出来的胶可能脏，不清楚，难看，或者对蛋白有影响。
加样没必要多加，能看清就行，加多了条带可能比较宽，算迁移率时不精确
最后蛋白测大了，不太清楚，是不是与你跑的特定的什么蛋白有关呢追问

我的没离心，样加多了，结果本应该是77KDa的蛋白跑出来只有60KDa左右（偏小）了，而且杂蛋白带也比较多 两者有联系么？

追答

啊对不起题没看清···不离心应该不会给结果有太大影响啊··你是自己分离的蛋白还是现成的， 别的不太清楚了··希望对你有点帮助···

追问

自己纯化的蛋白 自主实验……分析到了这里就分析不下去了……不想问老师

追答

额····你问问老师吧(∩_∩)···

Answer 2

离心，加样量和你的蛋白量大小完全没有关系。
提供一些可能性：
换protein ruler和加阳性对照再跑，确定不是系统误差。1次实验谁都没法说明是什么问题
蛋白可能降解了，原因很多，表达产物（热，光，酸碱，pH等）不稳定

其他你不写明白也不好说，最好还是问老师，又不用给小费，不问白不问