欧尼酱、尼桑、欧尼桑的区别为：原文写法不同、含义不同、侧重点不同
一、原文写法不同
1、欧尼酱：お兄ちゃん。
2、尼桑：さん。
3、欧尼桑：お兄さん。
二、含义不同
1、欧尼酱：哥哥，（葛葛音）撒娇的感觉。
2、尼桑：哥，正常的语气。
3、欧尼桑：兄长，很正式的语气。
三、侧重点不同
1、欧尼酱：是一种较为较亲昵的叫法。
2、尼桑：介于两者之间，不显得正式，同样也不突出亲昵。
3、欧尼桑：是一种较为尊敬的叫法。
欧尼酱：日语“お兄ちゃん”的谐音，很平常的，表示对兄长的亲切，是一种较为较亲昵的叫法。
欧尼桑：日语“お兄さん”的谐音，表示对兄长的尊称，是一种较为尊敬的叫法。
扩展知识：
日语中对于哥哥的昵称：
阿尼—— 兄—— a ni—— 对别人称自己的哥哥。
阿尼ki —— 兄贵 —— a ni ki —— 比较随意的叫法，同上。
尼尼 —— にに —— ni ni —— 非常亲昵，一般为小孩使用。
欧尼炭 —— お兄たん —— o ni i tya n —— 同上。
尼桑 —— 兄さん —— ni i sa n —— 较为尊敬，用于直接称呼自己哥哥。
欧尼桑 —— お兄さん —— o ni i sa n —— 尊敬，直接称呼自己哥哥或用于称呼别人哥哥。
欧尼撒嘛 —— お兄様 —— o ni i sa ma —— 最尊敬，一般不使用，常见于日漫中称呼皇兄等。
参考资料：
尼桑：也是比较普通常见的叫法，像平时喊得一个字“哥～”
欧尼酱：略有撒娇天真的感觉，一般小孩子比较喜欢这么叫吧..比较像“葛格”之类的囧..顺便讲一句叫尼尼也可以哦本回答被提问者采纳
欧尼酱：日语“お兄ちゃん”的谐音，很平常的，表示对兄长的亲切，是一种较为较亲昵的叫法。
欧尼桑：日语“お兄さん”的谐音，表示对兄长的尊称，是一种较为尊敬的叫法。
扩展知识：
日语中对于哥哥的昵称：
阿尼—— 兄—— a ni—— 对别人称自己的哥哥。
阿尼ki —— 兄贵 —— a ni ki —— 比较随意的叫法，同上。
尼尼 —— にに —— ni ni —— 非常亲昵，一般为小孩使用。
欧尼炭 —— お兄たん —— o ni i tya n —— 同上。
尼桑 —— 兄さん —— ni i sa n —— 较为尊敬，用于直接称呼自己哥哥。
欧尼桑 —— お兄さん —— o ni i sa n —— 尊敬，直接称呼自己哥哥或用于称呼别人哥哥。
欧尼撒嘛 —— お兄_ —— o ni i sa ma —— 最尊敬，一般不使用，常见于日漫中称呼皇兄等。
参考资料：