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为什么跑PCR要用CDNA,而不用本身的DNA
如题所述
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推荐答案 2016-11-18
你做的是不是RT-PCR, 这个就是以反转录得到的cDNA为模板的。
我们做的时候一般是提取植物总的RNA,然后采用Oligo(dT)或随机引物利用
逆转录酶
反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行
PCR扩增
,主要是获得目的基因或检测基因表达,判断目的基因mRNA转录水平的相对量的变化。因为直接提取DNA的话,并不能证明该基因在其他细胞体内进行表达,通过这种方法可以克服假阳性。仅供参考。
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为什么跑PCR要用CDNA,而不用本身的DNA
答:
cDNA易于从文库中获取,目的性强,且不含DNA中的非编码区和内含子序列
,经过扩增后既可以导入原核细胞也可以导入真核细胞,而DNA必须导入真核细胞,否则无法转录。
为什么跑PCR要用CDNA,而不用本身的DNA
答:
你做的是不是RT-
PCR,
这个就是以反转录得到
的cDNA
为模板的。我们做的时候一般是提取植物总的RNA,然后采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增,主要是获得目的基因或检测基因表达,判断目的基因mRNA转录水平的相对量的变化。因为直接提取DNA的话,并不能证明该基...
为什么跑PCR要用CDNA,而不用本身的DNA
答:
两者都可以用于
PCR
。
cDNA
是以mRNA为模板反转录形成的,以其为模板PCR可以获得目的基因或检测基因表达。
...DNA做模板进行
PCR
扩增,设计引物所选序列也
用cDNA
为模板有
什么
不同...
答:
对绝大多数基因而言,基因组DNA和cDNA差别很大,序列上有内含子的区别。首先你得明确你要
什么,
你要的片段在基因组和cDNA中的什么位置。如果仅仅是外显子中的一部分小片段,那
用cDNA
和基因组DNA设计引物也许没啥差别,但是如果你要的片段跨越了一个外显子,这时候就得分开考虑了。
...细菌细胞中表达真核生物的基因产物
,为什么
通常
要用cDNA而不用
...
答:
cDNA是用生物体的mRNA通过RT-
PCR
反转录而成的
,cDNA
在反转录过程中只能反转录出能够转录成mRNA的外显子,说明cDNA全部的核苷酸序列可以转录成mRNA并且成功翻译成蛋白质。。。
定量
PCR
是不是一定要以
cDNA
作模板,可不可以直接拿总DNA作模板直接做定 ...
答:
定量
PCR的
模版既可以使总DNA,也可以是
cDNA,
但两种做法的用途不同.如果用总DNA做模版,你检测的就是总DNA的拷贝数.如果以cDNA为模版,你检测的就是某个基因的表达水平.
请教各位,定量
PCR
是不是一定要以
cDNA
作模板,可不可以直接拿总DNA作模板...
答:
定量
PCR的
模版既可以使总DNA,也可以是
cDNA,
但两种做法的用途不同。如果用总DNA做模版,你检测的就是总DNA的拷贝数。如果以cDNA为模版,你检测的就是某个基因的表达水平。
pcr
体系中buffer和
cdna的
作用分别是
什么
答:
1、Buffer:主要是用来控制体系的pH和离子,为DNA聚合酶提供最佳工作环境。2、
cDNA
:cDNA是逆转录出来
的DNA,
主要是用来将mRNA变为单链DNA,作为
PCR
的模板。
pcr,cDNA
引物的问题
答:
"所以做
PCR,
用反转录得到
的cDNA
做引物"你这个理解是不对的
,cDNA
就是是作PCR模板
用的
;mRNA反转录的时候,是会有片段断裂或者不完整,但是,mRNA的拷贝数有几十万甚至几千万个
,不
会每个mRNA拷贝在你扩增的目的基因处都断裂或者降解掉的。另外,提取RMA的时候,一般情况不会有DNA污染的,就算有,我们...
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