细菌的基因敲除怎么做

如题所述

推荐答案 2018-09-13

传统细菌基因敲除基于细菌中广泛存在RecBCD系统，外源DNA片段（主要是自杀质粒）通过电转化或接合方式进入受体菌与基因组同源片段进行重组，实现基因的插入突变与缺失突变。另一种为利用来源于λ噬菌体的重组系统提供的重组酶，实现电转入的DNA片段（PCR产物）与基因组同源片段的替换，该种技术目前仅能在大肠杆菌以及邻近种中实现。由于细菌存在多样化的限制修饰系统，CRISPR-Cas在细菌中并不好用。广州诺晶生物可实现广泛范围内的细菌的基因敲除，服务周期短，成功率高。

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第1个回答 2017-04-20

细菌的基因敲除怎么做
细菌基因敲除的传统方法是利用自身的Rec系统对外源进入的DNA进行同源重组，从而实现目标基因的等位替换。通过设计靶基因的同源融合片段，本回答被网友采纳

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crisper cas9基因敲除原理答：基因敲除（Knock-out）Cas9可以对靶基因组进行剪切，形成DNA的双链断裂。在通常情况下，细胞会采用高效的非同源末端连接方式（NHEJ）对断裂的DNA进行修复。但是，在修复过程中通常会发生碱基插入或缺失的错配现象，造成移码突变，使靶标基因失去功能，从而实现基因敲除。基因抑制、基因激活（Repression or Act...

细菌基因敲除,只要敲除编码区中少数几个,还是把整个编码区都敲除?或者...答：一般只要敲除编码区一小段（1/3-1/4基因全长）就可以达到目的，但是你干吗不全敲除了呢？留下那么一小段还会翻译出无活性蛋白片断或者副作用的什么产物，还浪fei细胞资源。启动子区域能不能被敲除要看这个基因是不是单独享用的这个启动子，一般在原核细胞是操纵子（多基因共用一个启动子），那可...

基因敲除,怎么做最简单?答：基因敲除没有什么最简单的方法，都是利用胚胎发育来进行基因敲除的。基因敲除就是通过同源重组将外源基因定点整合入靶细胞基因组上某一确定的位点，以达到定点修饰改造染色体上某一基因的目的的一种技术。它克服了随机整合的盲目性和偶然性，是一种理想的修饰、改造生物遗传物质的方法。有关基因敲除实验鼠的...

crispr cas9基因敲除原理是什么?答：1、同源重组 同源重组（Homologous recombination）是最早用来编辑细胞基因组的技术方法。同源重组是在DNA的两条相似（同源）链之间遗传信息的交换（重组）。2、核酸酶基因编辑的关键是在基因组内特定位点创建DSB。常用的限制酶在切割DNA方面是有效的，但它们通常在多个位点进行识别和切割，特异性较差。为了...

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有人用CRISPR/Cas9系统做细胞基因敲除吗交流下答：有人用CRISPR/Cas9系统做细胞基因敲除 是的，确切来说是大量表达。大肠杆菌是基因重组技术中常用的细菌，将外源目的基因(如人胰岛素基因)导入大肠杆菌后可在大肠杆菌内表达目的蛋白(如胰岛素)，由于细菌繁殖速度快，通过发酵便可在短时间内获得大量胰岛素，再经多步分离、纯化便得到了药用胰岛素。流程大概...

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微生物代谢工程中的常用基因操作技术有哪些答：主要采用两种 PCR 方法，包括重叠延伸技术和大引物诱变法。在硫化细菌核苷水解酶对底物专一性的研究中，采用定点突变技术，对编码 221 位和 228 位氨基酸的 DNA 序列进行突变，改变两个位点的氨基酸，从而研究氨基酸残基对底物结合的影响。基因敲除(gene knock-out)：又称基因打靶，通过外源 DNA 与...

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