大多数质粒载体都是用
抗菌素抗性标记,包括氨苄青霉素抗性(Ampr)、卡那霉素抗性(Kanr)、
四环素抗性(Tetr)、链霉素抗性(Strr)和
氯霉素抗性(Cmlr))等.
i)氨苄青霉素(Ampicillin,Amp)是青霉素的衍生物,通过干扰细菌细胞壁合成的末端反应,杀死生长的细菌.细菌质粒Amp
r基因编码b-内酰胺酶,特异地切割氨苄青霉素的b-内酰胺环.
ii)氯霉素(chloramphenicol,Cml)通过与50S
核糖体亚基结合,干扰细胞蛋白质的合成并阻止
肽键的形成.杀死生长的细菌.细菌抗性原理是Cml
r编码乙酰转移酶,特异地使氯霉素乙酰化而失活.
iii)卡那霉素(kanamycin,Kan)通过与70S核糖体结合,导致mRNA发生错读.杀死细菌.而Kan r
编码的氨基糖苷磷酸转移酶,对卡那霉素进行修饰,阻断其与核糖体结合作用.
iv)链霉素(Streptomycin,Str)通过与30S核糖体亚基结合,导致mRNA错译.杀死细菌.Str
r编码一种氨基糖苷磷酸转移酶对链霉素进行修饰,阻断其与核糖体30S亚基结合作用.
v)四环素(Tetracycline,Tet)通过于30S核糖体亚基结合,干扰细胞蛋白质的合成并阻止肽键的形成.杀死生长的细菌.Tet r 编码特异性蛋白质,对细菌的膜结构进行修饰,组止四环素通过
细胞膜进入细菌细胞内.
抗生素抗性筛选原理是:不带有抗菌素抗性基因的受体菌不能在含有抗菌素的
培养基(选择培养基)中生长.当带有抗菌素抗性基因的载体进入受体菌后,受体菌才能生长