求助磷酸盐缓冲液的配制方法

Question

如题所述

Answer 1

磷酸盐缓冲液配制方法如下：
称取8gNaCl、0.2gKCl、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4，溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，zui后加蒸馏水定容至1L即可。在15lbf/in2（1034×105Pa）高压下蒸气灭菌（至少20分钟），保存存于室温或4℃冰箱中。

需要注意的是，通常所说的浓度0.01M指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na离子或K离子的浓度，Na离子和K离子只是用来调节渗透压的。
如果是用于免疫组化的话，则需要在配置的时候分别加入100u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。

Answer 2

磷酸缓冲液,即磷酸盐缓冲液（PB，Phosphate Buffer），是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液，通常使用的有磷酸钠缓冲液（NaH2PO4Na2HPO4）和磷酸钾缓冲液（K2HPO4KH2PO4)，由于它们有二级解离，缓冲的pH值范围很广。而PBS(Phosphate Buffered Saline)，可用PB磷酸盐缓冲液加入NaCl或者KCl进行配制，译名为磷酸盐缓冲生理盐水,也经常被人叫做磷酸盐缓冲液，主要用于细胞实验，NaCl，KCl的作用为调节渗透压。
简称：PB或者PB缓冲液.
配制:
0.2M磷酸缓冲液
磷酸缓冲液PH5.7--8.0(0.2M)
甲液：
NaH2PO4·2H2O：Mr=156.03，0.2mol/L溶液为31.21g/L，
NaH2PO4·H2O：Mr=138.01，0.2mol/L溶液为27.6g/L。
乙液：
Na2HPO4·2H2O：Mr=178.05，0.2mol/L溶液为35.61g/L，
Na2HPO4·7H2O：Mr=268.13，0.2mol/L溶液为53.624 g/L ，
Na2HPO4·12H2O：Mr=358.22，0.2mol/L溶液为71.64g/L。
磷酸缓冲液PH5.7--8.0(0.2M)
PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml) PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml)
5.7 93.5 6.5 6.9 45 55
5.8 92 8 7.0 39 61
5.9 90 10 7.1 33 67
6 87.7 12.3 7.2 28 72
6.1 85 15 7.3 23 77
6.2 81.5 18.5 7.4 19 81
6.3 77.5 22.5 7.5 16 84
6.4 73.5 26.5 7.6 13 87
6.5 68.5 31.5 7.7 10.5 89.5
6.6 62.5 37.5 7.8 8.5 91.5
6.7 56.5 43.5 7.9 7 93
6.8 51 49 8.0 5.3 94.7
根据要求的PH值,取X毫升甲液与Y毫升乙液,混合均匀即得.
1/15M 磷酸缓冲液
磷酸缓冲液PH4.49--9.18(1/15M)
PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml) PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml)
4.4 90 10 6.98 64
4.9 4 0. 1 9.9 7.71 7 3
5.29 0.25 9.75 7.58 8 2
5.59 0.5 9.5 7.75 9 1
5.91 1 9 8.04 9.5 0.5
6.24 2 8 8.2 9.7 0.3
6.47 3 7 8.54 9.75 0.25
6.64 4 6 8.68 9.9 0.1
6.81 5 5 9.18 10 0
乙液：一水磷酸二氢钠,1/15M溶液含9.2g/L
甲液：二水磷酸氢二钠,1/15M溶液含11.864g/L
根据要求的PH值,取X毫升甲液与Y毫升乙液,混合均匀即得.