磷酸缓冲液配制方法

Question

0.1M PH=7.0的要求。磷酸氢二钠和磷酸二氢钠的浓度和比例。最好有非常详尽的配置方法。非常感谢！

Answer 1

NaH2PO4•2H2O：10.86105g（或NaHPO4•12H2O：21.8502g） + NaH2PO4•2H2O：6.08595g（或NaH2PO4•H2O：10.76g），溶解，定容至1L
上述药品都是极易溶的，直接溶解就行了
附 磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（0.2mol/L）
pH值；0.2mol/LNa2HPO4溶液（mL）；0.2mol/LNaH2PO4溶液（mL）
5.8 ；8.0； 92.0
5.9 ；10.0 ； 90.0
6.0； 12.3 ； 87.7
6.1 ；15.0 ； 85.0
6.2 ；18.5 ； 81.5
6.3 ；22.5； 77.5
6.4 ；26.5 ； 73.5
6.5 ；31.5 ； 68.5
6.6 ；37.5； 62.5
6.7 ；43.5 ； 56.5
6.8 ；49.0； 51.0
6.9； 55.0 ； 45.0
7.0 ；61.0 ； 39.0
7.1 ；67.0 ； 33.0
7.2 ；72.0 ； 28.0
7.3 ；77.0 ； 23.0
7.4 ；81.0； 19.0
7.5 ；84.0 ； 16.0
7.6 ；87.0； 13.0
7.7 ；89.5； 10.5
7.8 ；91.5； 8.5
7.9 ；93.5 ； 7.5
8.0； 94.7 ； 5.3

NaH2PO4•2H2O：Mr=178.05，0.2mol/L溶液为35.61g/L;
NaHPO4•12H2O：Mr=358.22，0.2mol/L溶液为71.64g/L;
NaH2PO4•2H2O：Mr=156.03，0.2mol/L溶液为31.21g/L;
NaH2PO4•H2O：Mr=138.01，0.2mol/L溶液为27.6g/L。

此外，关于常用缓冲液的配方，你随便找一本生物化学实验书，翻至后面的附录就可以看到了

Answer 2

【配制方法】如下:

0.2M磷酸缓冲液

磷酸缓冲液PH5.7--8.0(0.2M)

甲液：

NaH2PO4·2H2O：Mr=156.03，0.2mol/L溶液为31.21g/L，

NaH2PO4·H2O：Mr=138.01，0.2mol/L溶液为27.6g/L。

乙液：

Na2HPO4·2H2O：Mr=178.05，0.2mol/L溶液为35.61g/L，

Na2HPO4·7H2O：Mr=268.13，0.2mol/L溶液为53.624 g/L ，

Na2HPO4·12H2O：Mr=358.22，0.2mol/L溶液为71.64g/L。

磷酸缓冲液PH5.7--8.0(0.2M)

PH    甲液X(ml)    乙液Y(ml)    PH    甲液X(ml)    乙液Y(ml)    

5.7    93.5    6.5    6.9    45    55    

5.8    92    8    7    39    61    

5.9    90    10    7.1    33    67    

6    87.7    12.3    7.2    28    72    

6.1    85    15    7.3    23    77    

6.2    81.5    18.5    7.4    19    81    

6.3    77.5    22.5    7.5    16    84    

6.4    73.5    26.5    7.6    13    87    

6.5    68.5    31.5    7.7    10.5    89.5    

6.6    62.5    37.5    7.8    8.5    91.5    

6.7    56.5    43.5    7.9    7    93    

6.8    51    49    8    5.3    94.7    

根据要求的PH值,取X毫升甲液与Y毫升乙液,混合均匀即得.

1/15M 磷酸缓冲液

磷酸缓冲液PH4.49--9.18(1/15M)

PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml) PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml)

4.4 90 10 6.98 64

4.9 40.1 9.9 7.71 7 3

5.29 0.25 9.75 7.58 8 2

5.59 0.5 9.5 7.75 9 1

5.91 19 8.04 9.5 0.5

6.24 2 8 8.2 9.7 0.3

6.47 3 7 8.54 9.75 0.25

6.64 4 6 8.68 9.9 0.1

6.81 5 5 9.18 10 0

乙液：一水磷酸二氢钠,1/15M溶液含9.2g/L

甲液：二水磷酸氢二钠,1/15M溶液含11.864g/L

根据要求的PH值,取X毫升甲液与Y毫升乙液,混合均匀即得.

【磷酸缓冲液简介】

磷酸缓冲液（PB，Phosphate Buffer），是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液，通常使用的有磷酸钠缓冲液（NaH2PO4&Na2HPO4）和磷酸钾缓冲液（K2HPO4&KH2PO4)，由于它们有二级解离，缓冲的pH值范围很广。

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Answer 3

磷酸缓冲液,即磷酸盐缓冲液（PB，Phosphate Buffer），是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液，通常使用的有磷酸钠缓冲液（NaH2PO4&Na2HPO4）和磷酸钾缓冲液（K2HPO4&KH2PO4)，由于它们有二级解离，缓冲的pH值范围很广。而PBS(Phosphate Buffered Saline)，可用PB磷酸盐缓冲液加入NaCl或者KCl进行配制，译名为磷酸盐缓冲生理盐水,也经常被人叫做磷酸盐缓冲液，主要用于细胞实验，NaCl，KCl的作用为调节渗透压。
简称：PB或者PB缓冲液.
配制:
0.2M磷酸缓冲液
磷酸缓冲液PH5.7--8.0(0.2M)
甲液：
NaH2PO4·2H2O：Mr=156.03，0.2mol/L溶液为31.21g/L，
NaH2PO4·H2O：Mr=138.01，0.2mol/L溶液为27.6g/L。
乙液：
Na2HPO4·2H2O：Mr=178.05，0.2mol/L溶液为35.61g/L，
Na2HPO4·7H2O：Mr=268.13，0.2mol/L溶液为53.624 g/L ，
Na2HPO4·12H2O：Mr=358.22，0.2mol/L溶液为71.64g/L。
磷酸缓冲液PH5.7--8.0(0.2M)
PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml) PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml)
5.7 93.5 6.5 6.9 45 55
5.8 92 8 7.0 39 61
5.9 90 10 7.1 33 67
6 87.7 12.3 7.2 28 72
6.1 85 15 7.3 23 77
6.2 81.5 18.5 7.4 19 81
6.3 77.5 22.5 7.5 16 84
6.4 73.5 26.5 7.6 13 87
6.5 68.5 31.5 7.7 10.5 89.5
6.6 62.5 37.5 7.8 8.5 91.5
6.7 56.5 43.5 7.9 7 93
6.8 51 49 8.0 5.3 94.7
根据要求的PH值,取X毫升甲液与Y毫升乙液,混合均匀即得.
1/15M 磷酸缓冲液
磷酸缓冲液PH4.49--9.18(1/15M)
PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml) PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml)
4.4 90 10 6.98 64
4.9 4 0. 1 9.9 7.71 7 3
5.29 0.25 9.75 7.58 8 2
5.59 0.5 9.5 7.75 9 1
5.91 1 9 8.04 9.5 0.5
6.24 2 8 8.2 9.7 0.3
6.47 3 7 8.54 9.75 0.25
6.64 4 6 8.68 9.9 0.1
6.81 5 5 9.18 10 0
乙液：一水磷酸二氢钠,1/15M溶液含9.2g/L
甲液：二水磷酸氢二钠,1/15M溶液含11.864g/L
根据要求的PH值,取X毫升甲液与Y毫升乙液,混合均匀即得.

Answer 4

磷酸氢二钠（mw：268 g / mol）    15.483克    0.0578M   

磷酸二氢钠（mw：138 g / mol）    5.827克    0.0422M

在合适的容器中准备800 mL蒸馏水。

向溶液中加入15.483g磷酸氢二钠七水合物。

向溶液中加入5.827g磷酸二氢钠一水合物。

使用HCl或NaOH将溶液调节至最终所需pH

加入蒸馏水直至体积为1升。

详细方法您可参考AAT Bioquest官网的计算器直接计算网页链接或者您也可以登录西安百萤生物官网直接使用计算器计算网页链接，希望可以帮到您。

Answer 5

磷酸盐缓冲液配制方法如下：
称取8gNaCl、0.2gKCl、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4，溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，zui后加蒸馏水定容至1L即可。在15lbf/in2（1034×105Pa）高压下蒸气灭菌（至少20分钟），保存存于室温或4℃冰箱中。

需要注意的是，通常所说的浓度0.01M指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na离子或K离子的浓度，Na离子和K离子只是用来调节渗透压的。
如果是用于免疫组化的话，则需要在配置的时候分别加入100u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。