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蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳实验时跑胶为什么要在低温下进行
如题所述
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推荐答案 2012-11-22
您好!
①
聚丙烯酰胺凝胶电泳
可分为
变性
及非变性蛋白电泳,一般用的较多的是变性电泳。蛋白在SDS及沸煮情况下已经是变性了。
② 电泳过程中由于电流关系,会产热。做非变性电泳时,一般要求冰浴反正蛋白热变性。变性电泳时也需要维持正常温度防止蛋白的扩散导致条带弥散。
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其他回答
第1个回答 2012-11-22
凝胶电泳时会产生热量,因而加速蛋白条带的扩散,而降低不同条带之间的分辨率。因此在低温下跑胶有利于克服这一种不利因素。
第2个回答 2012-11-22
加热、紫外线照射、剧烈振荡等物理方法使蛋白质变性,主要是破坏蛋白质分子中的氢键,在变化过程中也没有化学键的断裂和生成,没有新物质生成,因此是物理变化。否则,鸡蛋煮熟后就不是蛋白质了
第3个回答 2012-11-22
以防蛋白质变化
第4个回答 2012-11-22
高温会变性
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为什么
琼脂糖
凝胶电泳低温下
凝
答:
这是它们反应条件跟机制决定的
,再说了,后者也不是你说的反应高凝的就快啊,超过30°后,凝固的速度比开始降低一半以上
温度对
蛋白
酶活性影响的
实验
探究
答:
研究对象选用底物蛋白和蛋白酶,运用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对反应后的样本进行跑胶实验。
由于在不同温度和时间下蛋白酶活性强弱不同
,使得底物蛋白被切割的条带在聚丙烯酰胺凝胶上显示出的粗细不同,据此判断酶活性的强弱。实验结果验证了“酶的活性随着温度的升高而加快;当达到最适温度后再升温,酶的活性...
聚丙烯酰胺凝胶
圆盘电泳分离,
电泳时为什么要
把上层电泳曹接在负
答:
在上边加样,DNA,RNA都带负电,SDS处理后的蛋白也带负电。根据相关信息查询显示,跑DNA,DNA是带负电的,上槽就接负极,在上边加样,DNA,RNA都带负电,SDS处理后的蛋白也带负电。
有人知道
聚丙烯酰胺凝胶电泳
法中水封的原理吗?
为什么
水不会把还未凝固...
答:
水封作用有两个:一个隔绝气泡,以免空气中的氧气进入,影响催化聚合
;第二个作用是起到一定的压积作用,使得分离胶上表面更平整;至于后加水,由于前面已经形成胶液,所以不会被稀释
SDS-PAGE相关知识
答:
十二烷基硫酸钠
聚丙烯酰胺凝胶电泳
(SDS-PAGE)作为聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的一种,可测定
蛋白质
的分子量,对蛋白质组分进行分离、分析、纯化、定性、定量以及少量的制备。在 蛋白表达 中有着广泛应用,尤其是在 大肠杆菌表达系统 中,有着不可替代的作用。 (服务请咨询)1.SDS-PAGE的类型 在SDS-PAGE中...
SDS
聚丙烯酰胺凝胶电泳
的
实验
步骤
答:
结果使
蛋白质在
进入分离胶之前,快、慢离子之间浓缩成一薄层,有利于提高电泳的分辨率。2.分子筛效应蛋白质离子进入分离胶后,条件有很大变化。由于其pH升高(
电泳进行时
常超过9.0),使Gly解离成负离子的效应增加;同时因凝胶的浓度升高,蛋白质的泳动受到影响,迁移率急剧下降。此两项变化,...
凝胶电泳
的
实验
原理
答:
1.大的DNA或者RNA分子通常利用琼脂糖凝胶电泳(agarose gel electrophoresis)分离,也可以使用
聚丙烯酰胺凝胶电泳
(PAGE)。2.
蛋白质
的凝胶电泳通常在加入十二烷基硫酸钠的聚丙烯酰胺凝胶中进行(SDS-PAGE),或者非变性凝胶电泳,或二维电泳。3.毛细管电泳 4.酶谱法(zymography)5.变性梯度胶凝电泳(...
聚丙烯酰胺凝胶电泳
分离
蛋白质
的原理
答:
凝胶层的不连续性:不连续系统的凝胶包括浓缩胶和分离胶。浓缩胶的孔径大,分离胶的孔径小。在电场的作用下,
蛋白质
颗粒在大孔胶中泳动时遇到的阻力小,移动快。而在小孔胶中泳动时遇到的阻力大,移动慢。因此,在两层凝胶的交界处,由于凝胶孔径的不连续性使样品迁移受阻而压缩成很窄的区带。
聚丙烯酰胺凝胶电泳
答:
PAGE分离出的生物大分子经过染色或Western blotting,可以得到相应
蛋白质
或核酸的分子质量及其含量信息。第二段:
聚丙烯酰胺凝胶电泳在
生物科学中的应用 PAGE广泛应用于生物科学中,尤其在分离分析蛋白质和核酸方面。对于蛋白质而言,PAGE主要用于在已知蛋白质分子量的情况下,分离出不同的蛋白质种类,并用于...
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